高等学校化学学报
高等學校化學學報
고등학교화학학보
CHEMICAL JOURNAL OF CHINESE UNIVERSITIES
2015年
5期
886-892
,共7页
伍贤军%赵兵%缪璇%钱程%王冰瑜%李晓萌%杨百全
伍賢軍%趙兵%繆璇%錢程%王冰瑜%李曉萌%楊百全
오현군%조병%무선%전정%왕빙유%리효맹%양백전
混合斑%受精素β蛋白%多克隆抗体
混閤斑%受精素β蛋白%多剋隆抗體
혼합반%수정소β단백%다극륭항체
Mixed stain sample%Fertilin β%Polyclonal antibody
制备了精子表面膜抗原受精素β蛋白(Fertilinβ3)的特异性抗体,通过抗原-抗体反应和抗体固相偶联技术,将抗体连接到琼脂糖球珠上,建立了混合斑精子分离纯化的新方法.首先,通过聚合酶链式反应(PCR)扩增编码人受精素β蛋白第341～ 373位氨基酸的基因序列,构建PGEX-4T-1/Fertilinβ原核表达质粒;其次,诱导表达GST-Fertilinβ融合蛋白,制备受精素β蛋白多克隆抗体,免疫荧光检测结果表明,受精素β蛋白定位于精子的头后部,并且阴道上皮细胞没有受精素β蛋白的表达;最后,将受精素β抗体与ProteinA琼脂糖球珠连接构建固相抗体系统,将精子吸附于表面,可从混合斑(精子与阴道上皮细胞混合液)中分离纯化精子.本文为性犯罪案件侦破提供了新的方法.
製備瞭精子錶麵膜抗原受精素β蛋白(Fertilinβ3)的特異性抗體,通過抗原-抗體反應和抗體固相偶聯技術,將抗體連接到瓊脂糖毬珠上,建立瞭混閤斑精子分離純化的新方法.首先,通過聚閤酶鏈式反應(PCR)擴增編碼人受精素β蛋白第341～ 373位氨基痠的基因序列,構建PGEX-4T-1/Fertilinβ原覈錶達質粒;其次,誘導錶達GST-Fertilinβ融閤蛋白,製備受精素β蛋白多剋隆抗體,免疫熒光檢測結果錶明,受精素β蛋白定位于精子的頭後部,併且陰道上皮細胞沒有受精素β蛋白的錶達;最後,將受精素β抗體與ProteinA瓊脂糖毬珠連接構建固相抗體繫統,將精子吸附于錶麵,可從混閤斑(精子與陰道上皮細胞混閤液)中分離純化精子.本文為性犯罪案件偵破提供瞭新的方法.
제비료정자표면막항원수정소β단백(Fertilinβ3)적특이성항체,통과항원-항체반응화항체고상우련기술,장항체련접도경지당구주상,건립료혼합반정자분리순화적신방법.수선,통과취합매련식반응(PCR)확증편마인수정소β단백제341～ 373위안기산적기인서렬,구건PGEX-4T-1/Fertilinβ원핵표체질립;기차,유도표체GST-Fertilinβ융합단백,제비수정소β단백다극륭항체,면역형광검측결과표명,수정소β단백정위우정자적두후부,병차음도상피세포몰유수정소β단백적표체;최후,장수정소β항체여ProteinA경지당구주련접구건고상항체계통,장정자흡부우표면,가종혼합반(정자여음도상피세포혼합액)중분리순화정자.본문위성범죄안건정파제공료신적방법.
