CAJ | 학술논문

目的:建立水合氯醛去除成骨细胞初级纤毛的细胞模型,并观察去除成骨细胞初级纤毛对电磁场提高成骨细胞ALP染色和钙化结节染色的影响.方法:贴壁法分离培养3只出生3d,体重6～9 g的雄性SD大鼠的乳鼠颅骨成骨细胞;待上述细胞生长至融合状态时传代培养并随机分成4组:不加水合氯醛组(对照组)、2 mM、4 mM和8 mM水合氯醛处理组;将上述4组细胞置于37℃、5％CO2的培养箱培养72 h,用激光共聚焦扫描显微镜观察初级纤毛形态,并用Image-Pro Plus 6.0软件分析成骨细胞初级纤毛发生率;筛选出能有效去除成骨细胞初级纤毛的水合氯醛浓度的细胞,并将其分为以下3组:正常对照组(control group,C),电磁场处理(electromagnetic fields,EMFs)组及电磁场处理+4 mM水合氯醛组.向上述3组细胞加入含10％FBS的DMEM培养液继续培养9d,碱性磷酸酶组织化学染色观察ALP的形成;培养12d,茜素红染色观察钙化结节的形成.结果:与对照组和2mM水合氯醛组相比,4mM水合氯醛能有效地去除成骨细胞初级纤毛的发生(P＜0.01);去除成骨细胞初级纤毛消弱了EMFs促进成骨细胞ALP和钙化结节的形成,具体表现在:与EMFs组相比,EMFs+水合氯醛组ALP和钙化结节的染色面积明显减少(P＜0.01).结论:4 mM水合氯醛能有效去除成骨细胞的初级纤毛;初级纤毛部分参与了电磁场促进成骨细胞ALP和钙化结节的形成,为探讨电磁场促进成骨细胞成熟矿化的机理提供新思路.
목적:건립수합록철거제성골세포초급섬모적세포모형,병관찰거제성골세포초급섬모대전자장제고성골세포ALP염색화개화결절염색적영향.방법:첩벽법분리배양3지출생3d,체중6～9 g적웅성SD대서적유서로골성골세포;대상술세포생장지융합상태시전대배양병수궤분성4조:불가수합록철조(대조조)、2 mM、4 mM화8 mM수합록철처리조;장상술4조세포치우37℃、5％CO2적배양상배양72 h,용격광공취초소묘현미경관찰초급섬모형태,병용Image-Pro Plus 6.0연건분석성골세포초급섬모발생솔;사선출능유효거제성골세포초급섬모적수합록철농도적세포,병장기분위이하3조:정상대조조(control group,C),전자장처리(electromagnetic fields,EMFs)조급전자장처리+4 mM수합록철조.향상술3조세포가입함10％FBS적DMEM배양액계속배양9d,감성린산매조직화학염색관찰ALP적형성;배양12d,천소홍염색관찰개화결절적형성.결과:여대조조화2mM수합록철조상비,4mM수합록철능유효지거제성골세포초급섬모적발생(P＜0.01);거제성골세포초급섬모소약료EMFs촉진성골세포ALP화개화결절적형성,구체표현재:여EMFs조상비,EMFs+수합록철조ALP화개화결절적염색면적명현감소(P＜0.01).결론:4 mM수합록철능유효거제성골세포적초급섬모;초급섬모부분삼여료전자장촉진성골세포ALP화개화결절적형성,위탐토전자장촉진성골세포성숙광화적궤리제공신사로.