CAJ | 학술논문

目的：研究凋亡抑制因子α（ Livinα）特异的短发夹状 RNA（ shRNA）在MCF7乳腺癌细胞中对外源 Livinα基因表达的抑制作用。方法构建4组EGFP－Livinα融合表达的重组质粒，其中两组分别含shRNA 1、shRNA2对应的不同序列的cDNA干扰片断，分别电转染入MCF7乳腺癌细胞中，48h 后用荧光显微镜观察各实验组细胞中EGFP的表达，流式细胞仪检测转染后各组细胞的平均荧光强度。应用逆转录－聚合酶链反应（ RT－PCR）检测各组细胞中Livin α在RNA水平和蛋白水平的表达。结果酶切及测序证实质粒构建成功；荧光显微镜观察结果显示载体成功转染入MCF7乳腺癌细胞；干扰片段shRNA2可有效抑制目的基因mRNA的表达。结论成功构建的含目的基因有效干扰片断的质粒可抑制目的基因在MCF7乳腺癌细胞中的表达。
목적：연구조망억제인자α（ Livinα）특이적단발협상 RNA（ shRNA）재MCF7유선암세포중대외원 Livinα기인표체적억제작용。방법구건4조EGFP－Livinα융합표체적중조질립，기중량조분별함shRNA 1、shRNA2대응적불동서렬적cDNA간우편단，분별전전염입MCF7유선암세포중，48h 후용형광현미경관찰각실험조세포중EGFP적표체，류식세포의검측전염후각조세포적평균형광강도。응용역전록－취합매련반응（ RT－PCR）검측각조세포중Livin α재RNA수평화단백수평적표체。결과매절급측서증실질립구건성공；형광현미경관찰결과현시재체성공전염입MCF7유선암세포；간우편단shRNA2가유효억제목적기인mRNA적표체。결론성공구건적함목적기인유효간우편단적질립가억제목적기인재MCF7유선암세포중적표체。