中国实验方剂学杂志
中國實驗方劑學雜誌
중국실험방제학잡지
CHINESE JOURNAL OF EXPERIMENTAL TRADITIONAL MEDICAL FORMULAE
2015年
12期
19-22
,共4页
王桂娥%晁群芳%梁建芳%杨杨%殷亚兰
王桂娥%晁群芳%樑建芳%楊楊%慇亞蘭
왕계아%조군방%량건방%양양%은아란
新疆一枝蒿%干叶%DNA提取%改良CTAB法%琼脂糖凝胶电泳
新疆一枝蒿%榦葉%DNA提取%改良CTAB法%瓊脂糖凝膠電泳
신강일지호%간협%DNA제취%개량CTAB법%경지당응효전영
Artemisia rupestris%dry leaves%DNA extraction%modified CTAB method%agarose gel electrophoresis
目的:从自然干燥的新疆一枝蒿中提取高质量的基因组DNA,为该药材的分子生物学研究提供参考.方法:采用2种改良十六烷基三甲基溴化铵(CTAB)法与常规CTAB法提取新疆一枝蒿中基因组DNA,通过加适量聚乙烯吡咯烷酮(PVP)研磨样本,在核裂解前用细胞核裂解液(STE)洗涤多酚类和多糖类物质,利用95％乙醇室温沉淀DNA等措施.改良CTAB法2与1相比不用液氮研磨样本.通过琼脂糖凝胶电泳、紫外分光光度法和相关序列扩增多态性(SRAP)检测提取DNA的质量.结果:2种改良CTAB法所得DNA质量均优于常规CTAB法,DNA完整性较好,A260nm/A280nm在1.8 ～2.0,多糖类杂质去除较为干净.SRAP检验条带清晰、多态性良好.结论:2种改良CTAB法均适用于高质量新疆一枝蒿干叶基因组DNA的提取,得到的DNA纯度和完整性均较理想,可为后续分子生物学研究提供良好模版.
目的:從自然榦燥的新疆一枝蒿中提取高質量的基因組DNA,為該藥材的分子生物學研究提供參攷.方法:採用2種改良十六烷基三甲基溴化銨(CTAB)法與常規CTAB法提取新疆一枝蒿中基因組DNA,通過加適量聚乙烯吡咯烷酮(PVP)研磨樣本,在覈裂解前用細胞覈裂解液(STE)洗滌多酚類和多糖類物質,利用95％乙醇室溫沉澱DNA等措施.改良CTAB法2與1相比不用液氮研磨樣本.通過瓊脂糖凝膠電泳、紫外分光光度法和相關序列擴增多態性(SRAP)檢測提取DNA的質量.結果:2種改良CTAB法所得DNA質量均優于常規CTAB法,DNA完整性較好,A260nm/A280nm在1.8 ～2.0,多糖類雜質去除較為榦淨.SRAP檢驗條帶清晰、多態性良好.結論:2種改良CTAB法均適用于高質量新疆一枝蒿榦葉基因組DNA的提取,得到的DNA純度和完整性均較理想,可為後續分子生物學研究提供良好模版.
목적:종자연간조적신강일지호중제취고질량적기인조DNA,위해약재적분자생물학연구제공삼고.방법:채용2충개량십륙완기삼갑기추화안(CTAB)법여상규CTAB법제취신강일지호중기인조DNA,통과가괄량취을희필각완동(PVP)연마양본,재핵렬해전용세포핵렬해액(STE)세조다분류화다당류물질,이용95％을순실온침정DNA등조시.개량CTAB법2여1상비불용액담연마양본.통과경지당응효전영、자외분광광도법화상관서렬확증다태성(SRAP)검측제취DNA적질량.결과:2충개량CTAB법소득DNA질량균우우상규CTAB법,DNA완정성교호,A260nm/A280nm재1.8 ～2.0,다당류잡질거제교위간정.SRAP검험조대청석、다태성량호.결론:2충개량CTAB법균괄용우고질량신강일지호간협기인조DNA적제취,득도적DNA순도화완정성균교이상,가위후속분자생물학연구제공량호모판.
