中国家禽
中國傢禽
중국가금
CHINA POULTRY
2015年
11期
12-18
,共7页
张晨%蒋一秀%王颖洁%赵瑞丰%王曼%张文慧%靳锴%汪怡临%张亚妮
張晨%蔣一秀%王穎潔%趙瑞豐%王曼%張文慧%靳鍇%汪怡臨%張亞妮
장신%장일수%왕영길%조서봉%왕만%장문혜%근개%왕이림%장아니
鸡胚胎干细胞%雄性生殖细胞%分化%睾酮
鷄胚胎榦細胞%雄性生殖細胞%分化%睪酮
계배태간세포%웅성생식세포%분화%고동
试验旨在探讨睾酮对鸡胚胎干细胞(ESCs)向雄性生殖细胞分化过程中的诱导作用效果.首先对睾酮的适宜诱导浓度进行筛选,再联合支持细胞和维甲酸(RA)对传至2代的ESCs进行诱导,通过形态学观察、实时荧光定量PCR及免疫细胞化学对诱导结果进行检测.结果表明:单独使用睾酮诱导,未出现精原干细胞(SSCs)样细胞;睾酮与支持细胞联合诱导时,在第6天有少许类胚体出现,至第12天,有少量SSCs样细胞;睾酮联合支持细胞和RA诱导过程中,诱导第2天出现类胚体,诱导第12天后出现类SSCs样细胞.实时荧光定量PCR结果显示,睾酮+支持细胞组中,ESCs标记基因Nanog、Sox2表达量均呈持续下调趋势,Dazl、inte grinβ1、Stra8表达量持续上调;睾酮+支持细胞+RA共同诱导组中,各标记基因与ESCs向生殖细胞分化过程中各基因表达的趋势一致,并且Dazl的表达量明显高于对照组.睾酮单独诱导不能使ESCs向雄性生殖细胞分化,但有促进支持细胞和RA诱导效果的作用,该结果为进一步研究雄性生殖细胞的形成和调控机制提供理论基础.
試驗旨在探討睪酮對鷄胚胎榦細胞(ESCs)嚮雄性生殖細胞分化過程中的誘導作用效果.首先對睪酮的適宜誘導濃度進行篩選,再聯閤支持細胞和維甲痠(RA)對傳至2代的ESCs進行誘導,通過形態學觀察、實時熒光定量PCR及免疫細胞化學對誘導結果進行檢測.結果錶明:單獨使用睪酮誘導,未齣現精原榦細胞(SSCs)樣細胞;睪酮與支持細胞聯閤誘導時,在第6天有少許類胚體齣現,至第12天,有少量SSCs樣細胞;睪酮聯閤支持細胞和RA誘導過程中,誘導第2天齣現類胚體,誘導第12天後齣現類SSCs樣細胞.實時熒光定量PCR結果顯示,睪酮+支持細胞組中,ESCs標記基因Nanog、Sox2錶達量均呈持續下調趨勢,Dazl、inte grinβ1、Stra8錶達量持續上調;睪酮+支持細胞+RA共同誘導組中,各標記基因與ESCs嚮生殖細胞分化過程中各基因錶達的趨勢一緻,併且Dazl的錶達量明顯高于對照組.睪酮單獨誘導不能使ESCs嚮雄性生殖細胞分化,但有促進支持細胞和RA誘導效果的作用,該結果為進一步研究雄性生殖細胞的形成和調控機製提供理論基礎.
시험지재탐토고동대계배태간세포(ESCs)향웅성생식세포분화과정중적유도작용효과.수선대고동적괄의유도농도진행사선,재연합지지세포화유갑산(RA)대전지2대적ESCs진행유도,통과형태학관찰、실시형광정량PCR급면역세포화학대유도결과진행검측.결과표명:단독사용고동유도,미출현정원간세포(SSCs)양세포;고동여지지세포연합유도시,재제6천유소허류배체출현,지제12천,유소량SSCs양세포;고동연합지지세포화RA유도과정중,유도제2천출현류배체,유도제12천후출현류SSCs양세포.실시형광정량PCR결과현시,고동+지지세포조중,ESCs표기기인Nanog、Sox2표체량균정지속하조추세,Dazl、inte grinβ1、Stra8표체량지속상조;고동+지지세포+RA공동유도조중,각표기기인여ESCs향생식세포분화과정중각기인표체적추세일치,병차Dazl적표체량명현고우대조조.고동단독유도불능사ESCs향웅성생식세포분화,단유촉진지지세포화RA유도효과적작용,해결과위진일보연구웅성생식세포적형성화조공궤제제공이론기출.
