浙江医学
浙江醫學
절강의학
ZHEJIANG MEDICAL JOURNAL
2015年
7期
539-543,后插2
,共6页
钟泽%胡家庆%胡新央%蒋峻%吴新东%相鹏
鐘澤%鬍傢慶%鬍新央%蔣峻%吳新東%相鵬
종택%호가경%호신앙%장준%오신동%상붕
Myocardin相关转录因子-A%缺血再灌注%心肌凋亡
Myocardin相關轉錄因子-A%缺血再灌註%心肌凋亡
Myocardin상관전록인자-A%결혈재관주%심기조망
Mocardial myocardin-related transcription factor-A%Ischemia-reperfusion%Myocardial apoptosis
目的 研究Myocardin相关转录因子-A(MRTF-A)对缺氧缺血诱导的心肌细胞凋亡的影响及机制.方法 20只大鼠采用随机数字表分为假手术组和缺血再灌注组.假手术组大鼠实行开胸手术但不构建缺血再灌注模型,缺血再灌注组结扎冠状动脉30min再松开2h建立在体心肌缺血再灌注损伤模型.采用TUNEL法检测心肌细胞凋亡,免疫组化法检测MRTF-A表达;体外培养大鼠原代心肌细胞,转染MRTF-A及小分子mRNA表达质粒并构建缺氧缺血模型.通过流式细胞术检测细胞凋亡率,以Western blot法分析凋亡相关基因bcl-2蛋白表达;采用荧光素酶检测bcl-2转录活性.结果 假手术组和缺血再灌注组的心肌凋亡细胞分别为(8.14±2.33)％和(82.35±7.93)％,缺血再灌注组高于假手术组(P＜0 05).假手术组有少量MRTF-A蛋白表达,缺血再灌注组胞浆中有大量MRTF-A蛋白表达.在体外培养的原代心肌细胞中,对照组、模型组、MRTF-A处理组与MRTF-A抑制组的凋亡率分别为(4.63+2.33)％、(79.97+9.09)％、(43.63+3.52)％和(72.16+5.37)％;bcl-2的蛋白表达分别为0.313+0.014、0.186+0.019、0.254+0.013与0.175+0.017.模型组凋亡率高于对照组(P＜0.01),MRTF-A处理组的凋亡率低于模型组(P＜0.01);MRTF-A抑制组的凋亡率高于MRTF-A处理组(P＜0.05);模型组bcl-2的蛋白低于对照组(P＜0.01),MRTF-A处理组的bcl-2的蛋白高于模型组(P＜0.01);MRTF-A抑制组的bcl-2的蛋白低于MRTF-A处理组(P＜0.05);MRTF-A对bcl-2的转录活性的调控与对照组相比明显升高(P＜0.01),而MRTF-A对突变后的bcl-2的转录活性与对照组比较差异无统计学意义(P＞0.05).结论 缺血再灌注损伤诱导了大鼠心肌细胞凋亡,上调了心肌组织中MRTF-A的蛋白表达;MRTF-A通过上调bcl-2的转录活性表达起到对缺氧缺血诱导的大鼠原代心肌细胞凋亡损伤的保护作用.
目的 研究Myocardin相關轉錄因子-A(MRTF-A)對缺氧缺血誘導的心肌細胞凋亡的影響及機製.方法 20隻大鼠採用隨機數字錶分為假手術組和缺血再灌註組.假手術組大鼠實行開胸手術但不構建缺血再灌註模型,缺血再灌註組結扎冠狀動脈30min再鬆開2h建立在體心肌缺血再灌註損傷模型.採用TUNEL法檢測心肌細胞凋亡,免疫組化法檢測MRTF-A錶達;體外培養大鼠原代心肌細胞,轉染MRTF-A及小分子mRNA錶達質粒併構建缺氧缺血模型.通過流式細胞術檢測細胞凋亡率,以Western blot法分析凋亡相關基因bcl-2蛋白錶達;採用熒光素酶檢測bcl-2轉錄活性.結果 假手術組和缺血再灌註組的心肌凋亡細胞分彆為(8.14±2.33)％和(82.35±7.93)％,缺血再灌註組高于假手術組(P＜0 05).假手術組有少量MRTF-A蛋白錶達,缺血再灌註組胞漿中有大量MRTF-A蛋白錶達.在體外培養的原代心肌細胞中,對照組、模型組、MRTF-A處理組與MRTF-A抑製組的凋亡率分彆為(4.63+2.33)％、(79.97+9.09)％、(43.63+3.52)％和(72.16+5.37)％;bcl-2的蛋白錶達分彆為0.313+0.014、0.186+0.019、0.254+0.013與0.175+0.017.模型組凋亡率高于對照組(P＜0.01),MRTF-A處理組的凋亡率低于模型組(P＜0.01);MRTF-A抑製組的凋亡率高于MRTF-A處理組(P＜0.05);模型組bcl-2的蛋白低于對照組(P＜0.01),MRTF-A處理組的bcl-2的蛋白高于模型組(P＜0.01);MRTF-A抑製組的bcl-2的蛋白低于MRTF-A處理組(P＜0.05);MRTF-A對bcl-2的轉錄活性的調控與對照組相比明顯升高(P＜0.01),而MRTF-A對突變後的bcl-2的轉錄活性與對照組比較差異無統計學意義(P＞0.05).結論 缺血再灌註損傷誘導瞭大鼠心肌細胞凋亡,上調瞭心肌組織中MRTF-A的蛋白錶達;MRTF-A通過上調bcl-2的轉錄活性錶達起到對缺氧缺血誘導的大鼠原代心肌細胞凋亡損傷的保護作用.
목적 연구Myocardin상관전록인자-A(MRTF-A)대결양결혈유도적심기세포조망적영향급궤제.방법 20지대서채용수궤수자표분위가수술조화결혈재관주조.가수술조대서실행개흉수술단불구건결혈재관주모형,결혈재관주조결찰관상동맥30min재송개2h건립재체심기결혈재관주손상모형.채용TUNEL법검측심기세포조망,면역조화법검측MRTF-A표체;체외배양대서원대심기세포,전염MRTF-A급소분자mRNA표체질립병구건결양결혈모형.통과류식세포술검측세포조망솔,이Western blot법분석조망상관기인bcl-2단백표체;채용형광소매검측bcl-2전록활성.결과 가수술조화결혈재관주조적심기조망세포분별위(8.14±2.33)％화(82.35±7.93)％,결혈재관주조고우가수술조(P＜0 05).가수술조유소량MRTF-A단백표체,결혈재관주조포장중유대량MRTF-A단백표체.재체외배양적원대심기세포중,대조조、모형조、MRTF-A처리조여MRTF-A억제조적조망솔분별위(4.63+2.33)％、(79.97+9.09)％、(43.63+3.52)％화(72.16+5.37)％;bcl-2적단백표체분별위0.313+0.014、0.186+0.019、0.254+0.013여0.175+0.017.모형조조망솔고우대조조(P＜0.01),MRTF-A처리조적조망솔저우모형조(P＜0.01);MRTF-A억제조적조망솔고우MRTF-A처리조(P＜0.05);모형조bcl-2적단백저우대조조(P＜0.01),MRTF-A처리조적bcl-2적단백고우모형조(P＜0.01);MRTF-A억제조적bcl-2적단백저우MRTF-A처리조(P＜0.05);MRTF-A대bcl-2적전록활성적조공여대조조상비명현승고(P＜0.01),이MRTF-A대돌변후적bcl-2적전록활성여대조조비교차이무통계학의의(P＞0.05).결론 결혈재관주손상유도료대서심기세포조망,상조료심기조직중MRTF-A적단백표체;MRTF-A통과상조bcl-2적전록활성표체기도대결양결혈유도적대서원대심기세포조망손상적보호작용.
