中华普通外科杂志
中華普通外科雜誌
중화보통외과잡지
CHINESE JOURNAL OF GENERAL SURGERY
2015年
6期
466-470
,共5页
孙余省%方军%金劲激%陶礼钧%周珠哈%朱冠保
孫餘省%方軍%金勁激%陶禮鈞%週珠哈%硃冠保
손여성%방군%금경격%도례균%주주합%주관보
结肠肿瘤%查尔酮类%细胞凋亡
結腸腫瘤%查爾酮類%細胞凋亡
결장종류%사이동류%세포조망
Colonic neoplasms%Chalcons%Apoptosis
目的 通过对经初步筛选证明具有生物活性的查尔酮类似物H175可能涉及的信号通道进行检测,进一步明确其抗肿瘤活性及作用机制.方法 对于以查尔酮为先导物设计合成类似物,用MTT法检测其对小鼠结肠癌细胞(CT26)的杀伤作用,筛选出具有较好生物活性的化合物H175.通过流式细胞技术检测H175诱导CT26细胞凋亡和抑制细胞周期的情况.Western blot法检测CT26细胞中H175对于活性转录因子4(activating transcriptional factor 4,ATF-4)及DNA损伤诱导基因(DNA damage-inducible gene 153,CHOP)表达的影响.利用siRNA技术敲除CHOP后,用免疫荧光和流式细胞技术检测H175对于细胞凋亡的影响.结果 通过对113个自行设计合成查尔酮类似物进行筛选,发现H175对CT26细胞具有较强的增殖抑制作用(IC50=1.9 μmol/L).流式细胞技术检测发现H175通过诱导CT26细胞发生凋亡并抑制细胞周期发挥其生物活性.Western blot检测发现H175剂量依赖性激活内质网应激信号通路中的关键蛋白CHOP,并通过siRNA基因沉默技术进一步确证H175是通过刺激CHOP的过表达发挥促进细胞凋亡的作用.结论 查尔酮类似物H175通过激活内质网应激信号通道中的关键蛋白CHOP发挥对结肠癌CT26细胞的增殖抑制作用.
目的 通過對經初步篩選證明具有生物活性的查爾酮類似物H175可能涉及的信號通道進行檢測,進一步明確其抗腫瘤活性及作用機製.方法 對于以查爾酮為先導物設計閤成類似物,用MTT法檢測其對小鼠結腸癌細胞(CT26)的殺傷作用,篩選齣具有較好生物活性的化閤物H175.通過流式細胞技術檢測H175誘導CT26細胞凋亡和抑製細胞週期的情況.Western blot法檢測CT26細胞中H175對于活性轉錄因子4(activating transcriptional factor 4,ATF-4)及DNA損傷誘導基因(DNA damage-inducible gene 153,CHOP)錶達的影響.利用siRNA技術敲除CHOP後,用免疫熒光和流式細胞技術檢測H175對于細胞凋亡的影響.結果 通過對113箇自行設計閤成查爾酮類似物進行篩選,髮現H175對CT26細胞具有較彊的增殖抑製作用(IC50=1.9 μmol/L).流式細胞技術檢測髮現H175通過誘導CT26細胞髮生凋亡併抑製細胞週期髮揮其生物活性.Western blot檢測髮現H175劑量依賴性激活內質網應激信號通路中的關鍵蛋白CHOP,併通過siRNA基因沉默技術進一步確證H175是通過刺激CHOP的過錶達髮揮促進細胞凋亡的作用.結論 查爾酮類似物H175通過激活內質網應激信號通道中的關鍵蛋白CHOP髮揮對結腸癌CT26細胞的增殖抑製作用.
목적 통과대경초보사선증명구유생물활성적사이동유사물H175가능섭급적신호통도진행검측,진일보명학기항종류활성급작용궤제.방법 대우이사이동위선도물설계합성유사물,용MTT법검측기대소서결장암세포(CT26)적살상작용,사선출구유교호생물활성적화합물H175.통과류식세포기술검측H175유도CT26세포조망화억제세포주기적정황.Western blot법검측CT26세포중H175대우활성전록인자4(activating transcriptional factor 4,ATF-4)급DNA손상유도기인(DNA damage-inducible gene 153,CHOP)표체적영향.이용siRNA기술고제CHOP후,용면역형광화류식세포기술검측H175대우세포조망적영향.결과 통과대113개자행설계합성사이동유사물진행사선,발현H175대CT26세포구유교강적증식억제작용(IC50=1.9 μmol/L).류식세포기술검측발현H175통과유도CT26세포발생조망병억제세포주기발휘기생물활성.Western blot검측발현H175제량의뢰성격활내질망응격신호통로중적관건단백CHOP,병통과siRNA기인침묵기술진일보학증H175시통과자격CHOP적과표체발휘촉진세포조망적작용.결론 사이동유사물H175통과격활내질망응격신호통도중적관건단백CHOP발휘대결장암CT26세포적증식억제작용.
Objective To investigate the anti-tumor activity of a novel chalcone analogue-H175.Methods We synthesized chalcone analogues and further tested the cytotoxicity on colon cancer cell line (CT26) through MTT method,and identified H175 with powerful biological activity.Flow cytometry was used to assay the ability of H175 to induce CT26's apoptosis and inhibit its cell cycle.Western blot was used to detect the effect of H175 on ATF4 and CHOP expression in CT26.After knockdown CHOP by siRNA technology,further investigate the influence of H175 on cell's apoptosis through immunofluorescence (IF) and FCM.Results H175 inhibits the proliferation of CT26 (ICs0 =1.9 μmol/L),by inducing CT26's apoptosis inhibiting its cell cycle,on a dose-dependent manner of key protein CHOP of endocytoplasmic reticulum stress (ERS) signal path.siRNA technology confirmed H175 induce apoptosis by stimulating the CHOP over-expression.Conclusions Novel chalcone analogue-H175 show inhibitory effects on the proliferation of CT26 by activating the ERS signal path's key protein CHOP.