复旦学报(医学版)
複旦學報(醫學版)
복단학보(의학판)
FUDAN UNIVERSITY JOURNAL OF MEDICAL SCIENCES
2015年
3期
300-306
,共7页
杨佳音%简蓉蓉%许雅丽%周平
楊佳音%簡蓉蓉%許雅麗%週平
양가음%간용용%허아려%주평
CD73%动脉粥样硬化%血管平滑肌细胞
CD73%動脈粥樣硬化%血管平滑肌細胞
CD73%동맥죽양경화%혈관평활기세포
CD73%atherosclerosis%vascular smooth muscle cells
目的 探讨CD73对血管平滑肌细胞单核细胞趋化蛋白-1(moncyte chemoattractant protein-1,MCP-1)、IL-8和基质金属蛋白酶-1(matrix metatloproteinase-1,MMP-1)表达及迁移能力的影响,并分析其与动脉粥样硬化发生发展的关系.方法 原代培养人脐带动脉平滑肌细胞(human umbilical artery smooth muscle cells,HUASMC),利用RNA干扰技术抑制细胞中CD73的表达,以未转染组和阴性转染组为对照.实时荧光定量PCR和ELISA方法检测细胞表达及分泌MCP-1和IL-8的水平.实时荧光定量PCR和Western blot方法检测细胞表达MMP-1的情况.利用划痕实验观察CD73干扰对细胞迁移能力的影响.结果 成功培养原代HUASMC,并且CD73 siRNA转染可显著降低细胞内CD73表达水平.干扰HUASMC的CD73表达后,细胞表达和分泌MCP-1及IL-8的能力升高,细胞内MMP-1的表达升高,而细胞的迁移能力下降.结论 干扰CD73表达可以使HUASMC的MCP-1、IL-8及MMP-1表达升高;干扰CD73表达可降低HUASMC的迁移,提示CD73在动脉粥样硬化的发生发展过程中发挥重要的生物学作用.
目的 探討CD73對血管平滑肌細胞單覈細胞趨化蛋白-1(moncyte chemoattractant protein-1,MCP-1)、IL-8和基質金屬蛋白酶-1(matrix metatloproteinase-1,MMP-1)錶達及遷移能力的影響,併分析其與動脈粥樣硬化髮生髮展的關繫.方法 原代培養人臍帶動脈平滑肌細胞(human umbilical artery smooth muscle cells,HUASMC),利用RNA榦擾技術抑製細胞中CD73的錶達,以未轉染組和陰性轉染組為對照.實時熒光定量PCR和ELISA方法檢測細胞錶達及分泌MCP-1和IL-8的水平.實時熒光定量PCR和Western blot方法檢測細胞錶達MMP-1的情況.利用劃痕實驗觀察CD73榦擾對細胞遷移能力的影響.結果 成功培養原代HUASMC,併且CD73 siRNA轉染可顯著降低細胞內CD73錶達水平.榦擾HUASMC的CD73錶達後,細胞錶達和分泌MCP-1及IL-8的能力升高,細胞內MMP-1的錶達升高,而細胞的遷移能力下降.結論 榦擾CD73錶達可以使HUASMC的MCP-1、IL-8及MMP-1錶達升高;榦擾CD73錶達可降低HUASMC的遷移,提示CD73在動脈粥樣硬化的髮生髮展過程中髮揮重要的生物學作用.
목적 탐토CD73대혈관평활기세포단핵세포추화단백-1(moncyte chemoattractant protein-1,MCP-1)、IL-8화기질금속단백매-1(matrix metatloproteinase-1,MMP-1)표체급천이능력적영향,병분석기여동맥죽양경화발생발전적관계.방법 원대배양인제대동맥평활기세포(human umbilical artery smooth muscle cells,HUASMC),이용RNA간우기술억제세포중CD73적표체,이미전염조화음성전염조위대조.실시형광정량PCR화ELISA방법검측세포표체급분비MCP-1화IL-8적수평.실시형광정량PCR화Western blot방법검측세포표체MMP-1적정황.이용화흔실험관찰CD73간우대세포천이능력적영향.결과 성공배양원대HUASMC,병차CD73 siRNA전염가현저강저세포내CD73표체수평.간우HUASMC적CD73표체후,세포표체화분비MCP-1급IL-8적능력승고,세포내MMP-1적표체승고,이세포적천이능력하강.결론 간우CD73표체가이사HUASMC적MCP-1、IL-8급MMP-1표체승고;간우CD73표체가강저HUASMC적천이,제시CD73재동맥죽양경화적발생발전과정중발휘중요적생물학작용.