复旦学报（医学版）
複旦學報（醫學版）
복단학보（의학판）
FUDAN UNIVERSITY JOURNAL OF MEDICAL SCIENCES
2015年
3期
291-299,306
,共10页
杨秀方%褚凯丽%李媛%李瑶%黄燕
楊秀方%褚凱麗%李媛%李瑤%黃燕
양수방%저개려%리원%리요%황연
miR-132%hedgehog信号通路%非小细胞肺癌%PTCH1%细胞迁移和侵袭
miR-132%hedgehog信號通路%非小細胞肺癌%PTCH1%細胞遷移和侵襲
miR-132%hedgehog신호통로%비소세포폐암%PTCH1%세포천이화침습
miR-132%hedgehog signaling pathway%non-small cell lung cancer%PTCH1%cell migration and invasion
目的 研究miR-132在非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)细胞系H1299中的作用及相应的靶基因.方法 real-time PCR检测7种细胞系中miR-132的表达量.用CCK-8检测稳定株细胞H1299-pEGP-miR-132与H1299-pEGP-miR-null的生长速率的变化.使用稳定株细胞H1299检测miR-132对于细胞克隆形成、细胞迁移和细胞侵袭的影响.用Transwell结合matrigel的方法检测H1299-pEGP-miR-132细胞与H 1299-pEGP-miR-null细胞在72 h时细胞迁移和侵袭的变化,同时在H1299-pEGP-miR-132细胞中使用anti-miR-132进行了相关的实验验证.运用生物信息学方法预测miR-132的靶基因,并运用双荧光实验、real-time PCR和Western blot验证.在H1299-pEGP-miR-132细胞中共同转染anti-miR-132和PTCH1 siRNA检测其对细胞的增殖、迁移和侵袭的影响.结果 miR-132在肺癌细胞系中呈现高表达,在NSCLC细胞H1299中miR-132通过靶向调节PTCH1基因的表达发挥作用.H1299-pEGP-miR-132细胞的增殖(P＜0.01)、迁移(P＜0.05)、侵袭(P＜0.05)能力明显高于对照组.在H1299-pEGP-miR-132细胞中转入PTCH1 siRNA后细胞增殖能力升高(P＜0.05),迁移和侵袭能力降低(P＜0.001).H1299-pEGP-miR-132细胞15天形成的克隆数目是对照组细胞的1.41倍(P＜0.05).Western blot法检测显示miR-132使H1299中PTCH1蛋白表达量显著降低(0.68倍),anti-miR-132使PTCH1表达量显著升高(1.97倍).结论 miR-132可能参与NSCLC的细胞增殖、迁移和侵袭.它的致癌性部分归因于对Hh信号通路关键的负调控蛋白PTCH1的调节.
目的 研究miR-132在非小細胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)細胞繫H1299中的作用及相應的靶基因.方法 real-time PCR檢測7種細胞繫中miR-132的錶達量.用CCK-8檢測穩定株細胞H1299-pEGP-miR-132與H1299-pEGP-miR-null的生長速率的變化.使用穩定株細胞H1299檢測miR-132對于細胞剋隆形成、細胞遷移和細胞侵襲的影響.用Transwell結閤matrigel的方法檢測H1299-pEGP-miR-132細胞與H 1299-pEGP-miR-null細胞在72 h時細胞遷移和侵襲的變化,同時在H1299-pEGP-miR-132細胞中使用anti-miR-132進行瞭相關的實驗驗證.運用生物信息學方法預測miR-132的靶基因,併運用雙熒光實驗、real-time PCR和Western blot驗證.在H1299-pEGP-miR-132細胞中共同轉染anti-miR-132和PTCH1 siRNA檢測其對細胞的增殖、遷移和侵襲的影響.結果 miR-132在肺癌細胞繫中呈現高錶達,在NSCLC細胞H1299中miR-132通過靶嚮調節PTCH1基因的錶達髮揮作用.H1299-pEGP-miR-132細胞的增殖(P＜0.01)、遷移(P＜0.05)、侵襲(P＜0.05)能力明顯高于對照組.在H1299-pEGP-miR-132細胞中轉入PTCH1 siRNA後細胞增殖能力升高(P＜0.05),遷移和侵襲能力降低(P＜0.001).H1299-pEGP-miR-132細胞15天形成的剋隆數目是對照組細胞的1.41倍(P＜0.05).Western blot法檢測顯示miR-132使H1299中PTCH1蛋白錶達量顯著降低(0.68倍),anti-miR-132使PTCH1錶達量顯著升高(1.97倍).結論 miR-132可能參與NSCLC的細胞增殖、遷移和侵襲.它的緻癌性部分歸因于對Hh信號通路關鍵的負調控蛋白PTCH1的調節.
목적 연구miR-132재비소세포폐암(non-small cell lung cancer,NSCLC)세포계H1299중적작용급상응적파기인.방법 real-time PCR검측7충세포계중miR-132적표체량.용CCK-8검측은정주세포H1299-pEGP-miR-132여H1299-pEGP-miR-null적생장속솔적변화.사용은정주세포H1299검측miR-132대우세포극륭형성、세포천이화세포침습적영향.용Transwell결합matrigel적방법검측H1299-pEGP-miR-132세포여H 1299-pEGP-miR-null세포재72 h시세포천이화침습적변화,동시재H1299-pEGP-miR-132세포중사용anti-miR-132진행료상관적실험험증.운용생물신식학방법예측miR-132적파기인,병운용쌍형광실험、real-time PCR화Western blot험증.재H1299-pEGP-miR-132세포중공동전염anti-miR-132화PTCH1 siRNA검측기대세포적증식、천이화침습적영향.결과 miR-132재폐암세포계중정현고표체,재NSCLC세포H1299중miR-132통과파향조절PTCH1기인적표체발휘작용.H1299-pEGP-miR-132세포적증식(P＜0.01)、천이(P＜0.05)、침습(P＜0.05)능력명현고우대조조.재H1299-pEGP-miR-132세포중전입PTCH1 siRNA후세포증식능력승고(P＜0.05),천이화침습능력강저(P＜0.001).H1299-pEGP-miR-132세포15천형성적극륭수목시대조조세포적1.41배(P＜0.05).Western blot법검측현시miR-132사H1299중PTCH1단백표체량현저강저(0.68배),anti-miR-132사PTCH1표체량현저승고(1.97배).결론 miR-132가능삼여NSCLC적세포증식、천이화침습.타적치암성부분귀인우대Hh신호통로관건적부조공단백PTCH1적조절.
