中国抗生素杂志
中國抗生素雜誌
중국항생소잡지
CHINESE JOURNAL OF ANTIBIOTICS
2015年
6期
401-406
,共6页
王颖%刘忆霜%李兴华%白银磊%鲁众阳%肖春玲
王穎%劉憶霜%李興華%白銀磊%魯衆暘%肖春玲
왕영%류억상%리흥화%백은뢰%로음양%초춘령
NDM-1%高通量筛选%酶抑制剂
NDM-1%高通量篩選%酶抑製劑
NDM-1%고통량사선%매억제제
NDM-1%HTS%Enzyme inhibitor
目的 建立肺炎克雷伯菌(Klebsiella pneumoniae)新德里β-内酰胺酶1(New Delhi metallo-β-lactamase-1,NDM-1)抑制剂的高通量筛选模型,从不同来源的样品中筛选该酶抑制剂,以期获得作用于NDM-1的新型抗耐药阴性菌的药物或药物先导物.方法 克隆、表达并纯化肺炎克雷伯菌ATCC BAA-2146的NDM-1酶;基于在NDM-1作用下头孢硝噻吩溶液由黄色变成红色,且在486nm波长下具有光吸收的原理,建立酶活测定体系,构建和评价NDM-1抑制剂的高通量筛选模型;应用此模型筛选NDM-1抑制剂,评价其作为抗耐药阴性菌药物的可行性.结果 得到了重组NDM-1酶,构建了NDM-1酶抑制剂高通量筛选模型,筛选得到5个NDM-1抑制剂,其中化合物IMB-XW2为该酶的非竞争性抑制剂,其Ki值为4.6μmol/L,IC50为10.3 μmol/L;该化合物在4μg/mL时可以使表达NDM-1的大肠埃希菌对美罗培南的敏感度提高8倍.结论 成功构建了稳定性好、灵敏度高的NDM-1酶抑制剂的高通量筛选模型,应用该模型可筛选到NDM-1抑制剂,该抑制剂有可能成为新型的抗耐药革兰阴性菌的药物或药物先导物.
目的 建立肺炎剋雷伯菌(Klebsiella pneumoniae)新德裏β-內酰胺酶1(New Delhi metallo-β-lactamase-1,NDM-1)抑製劑的高通量篩選模型,從不同來源的樣品中篩選該酶抑製劑,以期穫得作用于NDM-1的新型抗耐藥陰性菌的藥物或藥物先導物.方法 剋隆、錶達併純化肺炎剋雷伯菌ATCC BAA-2146的NDM-1酶;基于在NDM-1作用下頭孢硝噻吩溶液由黃色變成紅色,且在486nm波長下具有光吸收的原理,建立酶活測定體繫,構建和評價NDM-1抑製劑的高通量篩選模型;應用此模型篩選NDM-1抑製劑,評價其作為抗耐藥陰性菌藥物的可行性.結果 得到瞭重組NDM-1酶,構建瞭NDM-1酶抑製劑高通量篩選模型,篩選得到5箇NDM-1抑製劑,其中化閤物IMB-XW2為該酶的非競爭性抑製劑,其Ki值為4.6μmol/L,IC50為10.3 μmol/L;該化閤物在4μg/mL時可以使錶達NDM-1的大腸埃希菌對美囉培南的敏感度提高8倍.結論 成功構建瞭穩定性好、靈敏度高的NDM-1酶抑製劑的高通量篩選模型,應用該模型可篩選到NDM-1抑製劑,該抑製劑有可能成為新型的抗耐藥革蘭陰性菌的藥物或藥物先導物.
목적 건립폐염극뢰백균(Klebsiella pneumoniae)신덕리β-내선알매1(New Delhi metallo-β-lactamase-1,NDM-1)억제제적고통량사선모형,종불동래원적양품중사선해매억제제,이기획득작용우NDM-1적신형항내약음성균적약물혹약물선도물.방법 극륭、표체병순화폐염극뢰백균ATCC BAA-2146적NDM-1매;기우재NDM-1작용하두포초새분용액유황색변성홍색,차재486nm파장하구유광흡수적원리,건립매활측정체계,구건화평개NDM-1억제제적고통량사선모형;응용차모형사선NDM-1억제제,평개기작위항내약음성균약물적가행성.결과 득도료중조NDM-1매,구건료NDM-1매억제제고통량사선모형,사선득도5개NDM-1억제제,기중화합물IMB-XW2위해매적비경쟁성억제제,기Ki치위4.6μmol/L,IC50위10.3 μmol/L;해화합물재4μg/mL시가이사표체NDM-1적대장애희균대미라배남적민감도제고8배.결론 성공구건료은정성호、령민도고적NDM-1매억제제적고통량사선모형,응용해모형가사선도NDM-1억제제,해억제제유가능성위신형적항내약혁란음성균적약물혹약물선도물.
