中国现代药物应用
中國現代藥物應用
중국현대약물응용
CHINESE JOURNAL OF MODERN DRUG APPLICATION
2015年
14期
275-277
,共3页
内皮细胞型一氧化氮合酶%G894T%多态性%聚合酶链反应-限制性片段长度多态性%最佳实验条件
內皮細胞型一氧化氮閤酶%G894T%多態性%聚閤酶鏈反應-限製性片段長度多態性%最佳實驗條件
내피세포형일양화담합매%G894T%다태성%취합매련반응-한제성편단장도다태성%최가실험조건
Endothelial nitric oxide synthase%G894T%Polymorphism%Polymerase chain reaction-restricted fragment length polymorphisms%Optimum experimental condition
目的:探讨聚合酶链反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)技术检测内皮细胞型一氧化氮合酶(eNOS) G894T多态性的最佳实验条件。方法对PCR和RFLP的一些影响因素进行研究。结果 PCR扩增eNOS基因的最佳条件为:20μmol/L的引物浓度;5.0 U的Taq酶量;112μmol/L的dNTP浓度。20μl体系中加4μl产物,5.0 U的酶消化4 h为最经济有效的酶切体系。结论最佳的实验条件的探索是进行大批量实验研究的关键。
目的:探討聚閤酶鏈反應-限製性片段長度多態性(PCR-RFLP)技術檢測內皮細胞型一氧化氮閤酶(eNOS) G894T多態性的最佳實驗條件。方法對PCR和RFLP的一些影響因素進行研究。結果 PCR擴增eNOS基因的最佳條件為:20μmol/L的引物濃度;5.0 U的Taq酶量;112μmol/L的dNTP濃度。20μl體繫中加4μl產物,5.0 U的酶消化4 h為最經濟有效的酶切體繫。結論最佳的實驗條件的探索是進行大批量實驗研究的關鍵。
목적:탐토취합매련반응-한제성편단장도다태성(PCR-RFLP)기술검측내피세포형일양화담합매(eNOS) G894T다태성적최가실험조건。방법대PCR화RFLP적일사영향인소진행연구。결과 PCR확증eNOS기인적최가조건위:20μmol/L적인물농도;5.0 U적Taq매량;112μmol/L적dNTP농도。20μl체계중가4μl산물,5.0 U적매소화4 h위최경제유효적매절체계。결론최가적실험조건적탐색시진행대비량실험연구적관건。
Objective To investigate the optimum experimental condition of polymerase chain reaction-restricted fragment length polymorphisms (PCR-EFLP) in detection of polymorphism of endothelial nitric oxide synthase (eNOS) G894T. Methods Research was made on influencing factors of PCR and RFLP. Results The optimum experimental conditions for PCR in amplification of eNOS gene included primer concentration as 20μmol/L, Taq enzyme amount as 5.0 U, and dNTP concentration as 112μmol/L. 4μl products in 20μl system under 4 h of 5.0 U enzymic digestion was the most financial enzymatic system. Conclusion Investigation of the optimum experimental condition is the key to implement large quantities of experiments.