中国临床药理学杂志
中國臨床藥理學雜誌
중국림상약이학잡지
THE CHINESE JOURNAL OF CLINICAL PHARMACOLOGY
2015年
12期
1150-1153,1161
,共5页
黄承芳%杨波%姜丹%周志斌
黃承芳%楊波%薑丹%週誌斌
황승방%양파%강단%주지빈
Toll样受体%RNA干扰%溶血磷脂酸%血管平滑肌细胞%表型转化
Toll樣受體%RNA榦擾%溶血燐脂痠%血管平滑肌細胞%錶型轉化
Toll양수체%RNA간우%용혈린지산%혈관평활기세포%표형전화
toll like receptor%RNA interference%lysophosphatidic acid%vascular smooth muscle cell%phenotypic modulation
目的：探讨Toll样受体4（TLR4）在溶血磷脂酸诱导的平滑肌细胞表型转化中的作用。方法建立原代培养的大鼠主动脉平滑肌细胞（ RASMC）模型，分别用3种TLR4特异性小干扰RNA（ siRNA）转染大鼠平滑肌细胞后，经过筛选TLR4－siRNA－2成为最佳RNA干扰序列。用1μmol? L－1溶血磷脂酸处理空白对照组、RASMC组、RASMC＋阴性对照siRNA组、RASMC＋TLR4－siRNA－2转染组4 h，镜下观察各组形态，用RT－PCR、Western法检测SMA－α及骨桥蛋白基因的表达。再用乙酰胆碱分别刺激上述溶血磷脂酸处理的各组RASMC，观察细胞形态变化并照相、用 RT －PCR 法检测 SMA －α及骨桥蛋白的表达。结果溶血磷脂酸诱导RASMC细胞骨桥蛋白基因的上调及SMA－α基因的下调，TLR4－siRNA转染细胞后可显著抑制溶血磷脂酸诱导的RASMC细胞骨桥蛋白基因上调及SMA－α基因下调，但对于RASMC细胞形态没有影响，部分抑制溶血磷脂酸诱导的RASMC细胞表型转化。结论溶血磷脂酸可能部分通过TLR4信号途径，促进细胞表型的转化，阻断TLR4受体，抑制信号通路后的炎症反应及免疫反应，有可能成为干预动脉粥样硬化潜在途径。
目的：探討Toll樣受體4（TLR4）在溶血燐脂痠誘導的平滑肌細胞錶型轉化中的作用。方法建立原代培養的大鼠主動脈平滑肌細胞（ RASMC）模型，分彆用3種TLR4特異性小榦擾RNA（ siRNA）轉染大鼠平滑肌細胞後，經過篩選TLR4－siRNA－2成為最佳RNA榦擾序列。用1μmol? L－1溶血燐脂痠處理空白對照組、RASMC組、RASMC＋陰性對照siRNA組、RASMC＋TLR4－siRNA－2轉染組4 h，鏡下觀察各組形態，用RT－PCR、Western法檢測SMA－α及骨橋蛋白基因的錶達。再用乙酰膽堿分彆刺激上述溶血燐脂痠處理的各組RASMC，觀察細胞形態變化併照相、用 RT －PCR 法檢測 SMA －α及骨橋蛋白的錶達。結果溶血燐脂痠誘導RASMC細胞骨橋蛋白基因的上調及SMA－α基因的下調，TLR4－siRNA轉染細胞後可顯著抑製溶血燐脂痠誘導的RASMC細胞骨橋蛋白基因上調及SMA－α基因下調，但對于RASMC細胞形態沒有影響，部分抑製溶血燐脂痠誘導的RASMC細胞錶型轉化。結論溶血燐脂痠可能部分通過TLR4信號途徑，促進細胞錶型的轉化，阻斷TLR4受體，抑製信號通路後的炎癥反應及免疫反應，有可能成為榦預動脈粥樣硬化潛在途徑。
목적：탐토Toll양수체4（TLR4）재용혈린지산유도적평활기세포표형전화중적작용。방법건립원대배양적대서주동맥평활기세포（ RASMC）모형，분별용3충TLR4특이성소간우RNA（ siRNA）전염대서평활기세포후，경과사선TLR4－siRNA－2성위최가RNA간우서렬。용1μmol? L－1용혈린지산처리공백대조조、RASMC조、RASMC＋음성대조siRNA조、RASMC＋TLR4－siRNA－2전염조4 h，경하관찰각조형태，용RT－PCR、Western법검측SMA－α급골교단백기인적표체。재용을선담감분별자격상술용혈린지산처리적각조RASMC，관찰세포형태변화병조상、용 RT －PCR 법검측 SMA －α급골교단백적표체。결과용혈린지산유도RASMC세포골교단백기인적상조급SMA－α기인적하조，TLR4－siRNA전염세포후가현저억제용혈린지산유도적RASMC세포골교단백기인상조급SMA－α기인하조，단대우RASMC세포형태몰유영향，부분억제용혈린지산유도적RASMC세포표형전화。결론용혈린지산가능부분통과TLR4신호도경，촉진세포표형적전화，조단TLR4수체，억제신호통로후적염증반응급면역반응，유가능성위간예동맥죽양경화잠재도경。
Objective To investigate the effects of special siRNA target-ting toll like receptor 4 ( TLR4) gene( TLR4-siRNA) on LPA-stimu-lated phenotypic modulation of vascular smooth muscle cells.Methods depressed by TLR4 -siRNA transfection, which held back the down -regulation of SMA -αgene expression, de-pressed up-regulation of osteopontin gene expression induced by lysophosphatidic acid, but there were no cell shape changes as compared with dedifferentiated RASMCs.Conclusion LPA-stimulated phenotypic modulation of VSMC may partly involve TLR4 pathway.Inhibition of inflammatory and immunity reaction might be a potential novel target for therapeutic intervention for arteriosclerosis.
