CAJ | 학술논문

目的:构建带His标签的人造血相关PBX相互作用蛋白(HPIP)的原核表达载体,获得His-HPIP融合蛋白,并对其生物学功能进行初步检测.方法:以本实验室保存的pcDNA3.0-HPIP质粒为模板,采用PCR技术扩增HPIP编码序列,将其插入载体pET-28a(+)中,经BamH I和HindⅢ双酶切鉴定后转化大肠杆菌Rossate株进行小量诱导,挑选能诱导出His-HPIP的菌液进行融合蛋白的纯化,采用SDS-PAGE和Western印迹检测融合蛋白的纯化效果,采用GST pull-down技术对蛋白的生物学功能进行初步鉴定.结果:双酶切和测序结果表明His-HPIP原核表达质粒构建成功;His pull-down实验证实His-HPIP蛋白和雌激素受体α存在相互作用,说明生物学活性良好.结论:原核表达并纯化出His-HPIP融合蛋白,为进一步研究HPIP在肿瘤发生发展中的功能奠定了基础.
목적:구건대His표첨적인조혈상관PBX상호작용단백(HPIP)적원핵표체재체,획득His-HPIP융합단백,병대기생물학공능진행초보검측.방법:이본실험실보존적pcDNA3.0-HPIP질립위모판,채용PCR기술확증HPIP편마서렬,장기삽입재체pET-28a(+)중,경BamH I화HindⅢ쌍매절감정후전화대장간균Rossate주진행소량유도,도선능유도출His-HPIP적균액진행융합단백적순화,채용SDS-PAGE화Western인적검측융합단백적순화효과,채용GST pull-down기술대단백적생물학공능진행초보감정.결과:쌍매절화측서결과표명His-HPIP원핵표체질립구건성공;His pull-down실험증실His-HPIP단백화자격소수체α존재상호작용,설명생물학활성량호.결론:원핵표체병순화출His-HPIP융합단백,위진일보연구HPIP재종류발생발전중적공능전정료기출.