生物技术通讯
生物技術通訊
생물기술통신
LETTERS IN BIOTECHNOLOGY
2015年
3期
329-333
,共5页
孙维来%杨裔%宁秀哲%郭晶晶%于虹%郭彦%寇志华%周育森
孫維來%楊裔%寧秀哲%郭晶晶%于虹%郭彥%寇誌華%週育森
손유래%양예%저수철%곽정정%우홍%곽언%구지화%주육삼
蛇毒蛋白triflin%致病相关蛋白1%原核表达%佐剂
蛇毒蛋白triflin%緻病相關蛋白1%原覈錶達%佐劑
사독단백triflin%치병상관단백1%원핵표체%좌제
snake venom protein triflin%pathogenesis-related 1 protein%prokaryotic expression%adjuvant
目的:获得具有生物学活性的蛇毒蛋白triflin的致病相关蛋白1(PR-1)功能区TFPR1.方法:分析triflin空间结构及其保守结构域,获得TFPR1序列,并进行密码子优化、全基因合成,构建原核表达质粒pET-TFPR1,在大肠杆菌BL21中以IPTG诱导表达,表达产物经Western印迹鉴定后,镍柱纯化、复性,对复性后的产物进行特性分析;以复性的TFPR1肌肉途径接种BALB/c雌性小鼠,分析其生物学活性.结果:TFPR1以包涵体形式表达,复性后蛋白纯度大于95％,无需佐剂免疫小鼠即可诱导机体产生效价为20万的抗TFPR1抗体.结论:制备了具有生物学活性的重组蛋白TFPR1,为后续研究TFPR1的生物学功能奠定了物质基础.
目的:穫得具有生物學活性的蛇毒蛋白triflin的緻病相關蛋白1(PR-1)功能區TFPR1.方法:分析triflin空間結構及其保守結構域,穫得TFPR1序列,併進行密碼子優化、全基因閤成,構建原覈錶達質粒pET-TFPR1,在大腸桿菌BL21中以IPTG誘導錶達,錶達產物經Western印跡鑒定後,鎳柱純化、複性,對複性後的產物進行特性分析;以複性的TFPR1肌肉途徑接種BALB/c雌性小鼠,分析其生物學活性.結果:TFPR1以包涵體形式錶達,複性後蛋白純度大于95％,無需佐劑免疫小鼠即可誘導機體產生效價為20萬的抗TFPR1抗體.結論:製備瞭具有生物學活性的重組蛋白TFPR1,為後續研究TFPR1的生物學功能奠定瞭物質基礎.
목적:획득구유생물학활성적사독단백triflin적치병상관단백1(PR-1)공능구TFPR1.방법:분석triflin공간결구급기보수결구역,획득TFPR1서렬,병진행밀마자우화、전기인합성,구건원핵표체질립pET-TFPR1,재대장간균BL21중이IPTG유도표체,표체산물경Western인적감정후,얼주순화、복성,대복성후적산물진행특성분석;이복성적TFPR1기육도경접충BALB/c자성소서,분석기생물학활성.결과:TFPR1이포함체형식표체,복성후단백순도대우95％,무수좌제면역소서즉가유도궤체산생효개위20만적항TFPR1항체.결론:제비료구유생물학활성적중조단백TFPR1,위후속연구TFPR1적생물학공능전정료물질기출.
