CAJ | 학술논문

目的探讨针对HCV 5'-NCR/C双靶基因位点的锁核酸核酶对病毒基因复制与表达的特异性抑制作用.方法实验分对照组和实验组.对照组分别为空白对照组和脂质体对照组.实验组分别为单靶区NCR组、单靶区C组和双靶区NCR/C组.半乳糖配体介导转染HepG2.9706细胞,用荧光定量PCR检测细胞培养液中HCV mRNA表达;化学发光技术检测细胞培养液中荧光素酶基因表达;荧光显微镜系统检测细胞内荧光蛋白表达;四甲基偶氮唑蓝法检测细胞代谢.应用SPSS 19.0统计学软件分析.各组间比较采用重复测量方差分析的SNK检验和Kruskal Wallis H检验.结果加入锁核酸核酶后,对HCV RNA的复制均显示有较强的抑制作用(F=77.50,P＜0.05),单靶区NCR组、单靶区C组和双靶区NCR/C组的平均抑制率分别为62.12％、61.39％和75.37％;对荧光素酶的表达有抑制作用(F =48.65,P＜0.05),平均抑制率分别为66.49％、65.06％和73.30％.给药后24、48和96 h,HCV mRNA的平均抑制率分别为52.36％、66.81％和75.05％;荧光素酶的平均抑制率分别为53.02％、62.98％和79.45％;细胞内的荧光蛋白表达阳性细胞数均较对照组明显减少(P＜0.05).结论针对5'-NCR/C基因位点的LNAzyme能特异性抑制丙型肝炎病毒的复制与表达,且双基因靶位优于单基因靶位.
목적 탐토침대HCV 5'-NCR/C쌍파기인위점적쇄핵산핵매대병독기인복제여표체적특이성억제작용.방법 실험분대조조화실험조.대조조분별위공백대조조화지질체대조조.실험조분별위단파구NCR조、단파구C조화쌍파구NCR/C조.반유당배체개도전염HepG2.9706세포,용형광정량PCR검측세포배양액중HCV mRNA표체;화학발광기술검측세포배양액중형광소매기인표체;형광현미경계통검측세포내형광단백표체;사갑기우담서람법검측세포대사.응용SPSS 19.0통계학연건분석.각조간비교채용중복측량방차분석적SNK검험화Kruskal Wallis H검험.결과 가입쇄핵산핵매후,대HCV RNA적복제균현시유교강적억제작용(F=77.50,P＜0.05),단파구NCR조、단파구C조화쌍파구NCR/C조적평균억제솔분별위62.12％、61.39％화75.37％;대형광소매적표체유억제작용(F =48.65,P＜0.05),평균억제솔분별위66.49％、65.06％화73.30％.급약후24、48화96 h,HCV mRNA적평균억제솔분별위52.36％、66.81％화75.05％;형광소매적평균억제솔분별위53.02％、62.98％화79.45％;세포내적형광단백표체양성세포수균교대조조명현감소(P＜0.05).결론 침대5'-NCR/C기인위점적LNAzyme능특이성억제병형간염병독적복제여표체,차쌍기인파위우우단기인파위.