基础医学与临床
基礎醫學與臨床
기출의학여림상
BASIC MEDICAL SCIENCES AND CLINICS
2015年
7期
894-899
,共6页
夏飞%伍志盟%李美玲%邓莉%胡勤%郭风劲
夏飛%伍誌盟%李美玲%鄧莉%鬍勤%郭風勁
하비%오지맹%리미령%산리%호근%곽풍경
ATF4%慢病毒%成骨分化%细胞增殖%细胞凋亡
ATF4%慢病毒%成骨分化%細胞增殖%細胞凋亡
ATF4%만병독%성골분화%세포증식%세포조망
ATF4%lentivirus%osteogenic differentiation%cell proliferation%cell apoptosis
目的 构建人活性转录因子4(ATF4)慢病毒,探讨C2C12细胞成骨分化过程中ATF4基因慢病毒修饰对其增殖和凋亡的影响.方法 构建ATF4重组慢病毒载体质粒,然后与2个包装质粒共转入293T细胞中包装成ATF4慢病毒(LV-ATF4);用病毒感染C2C12细胞,并用流式细胞仪(FCM)检测BMP2诱导C2C12细胞分化时对其增殖凋亡的影响,免疫印迹法检测凋亡相关蛋白的表达,电子显微镜观察凋亡细胞的形态学结构变化.结果 成功构建和包装了ATF4重组慢病毒.FCM检测结果表明,BMP2+ LV-ATF4处理组S期细胞(14.89％)低于BMP2+ LV-GFP组(30.64％) (P ＜0.05);BMP2+ LV-ATF4处理组细胞凋亡率(31.06％)高于BMP2+ LV-GFP组(11.39％)(P＜0.05);凋亡相关蛋白的表达与FCM结果一致.结论 在BMP2诱导C2C12细胞成骨分化时,LV-ATT4慢病毒可促进C2C12细胞的凋亡,抑制其增殖.
目的 構建人活性轉錄因子4(ATF4)慢病毒,探討C2C12細胞成骨分化過程中ATF4基因慢病毒脩飾對其增殖和凋亡的影響.方法 構建ATF4重組慢病毒載體質粒,然後與2箇包裝質粒共轉入293T細胞中包裝成ATF4慢病毒(LV-ATF4);用病毒感染C2C12細胞,併用流式細胞儀(FCM)檢測BMP2誘導C2C12細胞分化時對其增殖凋亡的影響,免疫印跡法檢測凋亡相關蛋白的錶達,電子顯微鏡觀察凋亡細胞的形態學結構變化.結果 成功構建和包裝瞭ATF4重組慢病毒.FCM檢測結果錶明,BMP2+ LV-ATF4處理組S期細胞(14.89％)低于BMP2+ LV-GFP組(30.64％) (P ＜0.05);BMP2+ LV-ATF4處理組細胞凋亡率(31.06％)高于BMP2+ LV-GFP組(11.39％)(P＜0.05);凋亡相關蛋白的錶達與FCM結果一緻.結論 在BMP2誘導C2C12細胞成骨分化時,LV-ATT4慢病毒可促進C2C12細胞的凋亡,抑製其增殖.
목적 구건인활성전록인자4(ATF4)만병독,탐토C2C12세포성골분화과정중ATF4기인만병독수식대기증식화조망적영향.방법 구건ATF4중조만병독재체질립,연후여2개포장질립공전입293T세포중포장성ATF4만병독(LV-ATF4);용병독감염C2C12세포,병용류식세포의(FCM)검측BMP2유도C2C12세포분화시대기증식조망적영향,면역인적법검측조망상관단백적표체,전자현미경관찰조망세포적형태학결구변화.결과 성공구건화포장료ATF4중조만병독.FCM검측결과표명,BMP2+ LV-ATF4처리조S기세포(14.89％)저우BMP2+ LV-GFP조(30.64％) (P ＜0.05);BMP2+ LV-ATF4처리조세포조망솔(31.06％)고우BMP2+ LV-GFP조(11.39％)(P＜0.05);조망상관단백적표체여FCM결과일치.결론 재BMP2유도C2C12세포성골분화시,LV-ATT4만병독가촉진C2C12세포적조망,억제기증식.
