中国预防兽医学报
中國預防獸醫學報
중국예방수의학보
CHINESE JOURNAL OF PREVENTIVE VETERINARY MEDICINE
2015年
6期
422-425
,共4页
张雪梅%赵妍%张晓彩%王云峰
張雪梅%趙妍%張曉綵%王雲峰
장설매%조연%장효채%왕운봉
重组鸡痘病毒%插入位点%增强型绿色荧光蛋白
重組鷄痘病毒%插入位點%增彊型綠色熒光蛋白
중조계두병독%삽입위점%증강형록색형광단백
recombinant fowlpox virus%inserting site%EGFP
为筛选新的高效的鸡痘病毒(FPV)中外源基因的插入位点,本研究选择FPV ORF161与ORF162之间的基因间隔区作为重组位点,构建表达增强型绿色荧光蛋白(EGFP)的转移载体,以表达鸡传染性喉气管炎病毒gB基因的重组FPV (rFPV-gB)为亲本病毒,通过在鸡胚成纤维细胞(CEF)中同源重组,并经过蚀斑纯化筛选获得能够稳定表达gfp报告基因的重组病毒,命名为rFPV-gB161gfp.将rFPV-gB 161 gfp与亲本病毒连续传代20代,每5代进行荧光显微镜观察、PCR检测及复制动力学比较,结果表明重组病毒遗传稳定性良好,而且重组病毒与亲本病毒生长特性一致.本研究鉴定的新外源基因插入位点为构建多价重组FPV疫苗奠定了基础.
為篩選新的高效的鷄痘病毒(FPV)中外源基因的插入位點,本研究選擇FPV ORF161與ORF162之間的基因間隔區作為重組位點,構建錶達增彊型綠色熒光蛋白(EGFP)的轉移載體,以錶達鷄傳染性喉氣管炎病毒gB基因的重組FPV (rFPV-gB)為親本病毒,通過在鷄胚成纖維細胞(CEF)中同源重組,併經過蝕斑純化篩選穫得能夠穩定錶達gfp報告基因的重組病毒,命名為rFPV-gB161gfp.將rFPV-gB 161 gfp與親本病毒連續傳代20代,每5代進行熒光顯微鏡觀察、PCR檢測及複製動力學比較,結果錶明重組病毒遺傳穩定性良好,而且重組病毒與親本病毒生長特性一緻.本研究鑒定的新外源基因插入位點為構建多價重組FPV疫苗奠定瞭基礎.
위사선신적고효적계두병독(FPV)중외원기인적삽입위점,본연구선택FPV ORF161여ORF162지간적기인간격구작위중조위점,구건표체증강형록색형광단백(EGFP)적전이재체,이표체계전염성후기관염병독gB기인적중조FPV (rFPV-gB)위친본병독,통과재계배성섬유세포(CEF)중동원중조,병경과식반순화사선획득능구은정표체gfp보고기인적중조병독,명명위rFPV-gB161gfp.장rFPV-gB 161 gfp여친본병독련속전대20대,매5대진행형광현미경관찰、PCR검측급복제동역학비교,결과표명중조병독유전은정성량호,이차중조병독여친본병독생장특성일치.본연구감정적신외원기인삽입위점위구건다개중조FPV역묘전정료기출.
