中国防痨杂志
中國防癆雜誌
중국방로잡지
BULLETIN OF THE CHINESE ANTITUBERCULOSIS ASSOCIATION
2015年
6期
632-636
,共5页
左小淑%王彬%徐建%付雷%陆宇
左小淑%王彬%徐建%付雷%陸宇
좌소숙%왕빈%서건%부뢰%륙우
结核分枝杆菌%氯法齐明%抗药性,细菌%体外研究
結覈分枝桿菌%氯法齊明%抗藥性,細菌%體外研究
결핵분지간균%록법제명%항약성,세균%체외연구
Mycobacterium tuberculosis%Clofazimine%Drug resistance,bacterial%In vitro
目的 利用浓度梯度倍增的氯法齐明(clofazimine,Cfz)体外诱导获得结核分枝杆菌(Mycobacterium tuberculosis,Mtb)耐药株,并进行耐药机制的初步研究.方法 选取Mtb标准株H37Rv,从亚最低抑菌浓度(subminimal inhibitory concentration,sub-MIC) [1/8 MIC(按照Cfz的MIC值为0.12 μg/ml配置)、1/4 MIC、1/2 MIC …]开始,在Cfz浓度倍增的7H11固体培养基上进行传代培养,逐步诱导菌株对Cfz的耐药性,并通过药物敏感性试验和全基因组测序来进行验证;同时利用Alamar blue微板分析法(microplate Alamar blue assay,MABA)测定诱导耐药菌株对10种抗结核药物(INH、RFP、EMB、Mfx、Lzd、Cs、Cm、TMC207、TBI-166、Cfz)的MIC情况.结果Mtb标准株经诱导后对Cfz的MIC值是诱导前的32～64倍(诱导前Cfz的MIC值是0.12 μg/ml).对10种抗结核药物敏感性试验显示,Cfz诱导耐药菌株对TMC207 (Bendaquiline)及TBI-166产生交叉耐药.耐药株在7H9液体培养基中进行无药连续培养10代后,测定其MIC值无明显变化,MIC数值都稳定在32MIC～64MIC之间,对此诱导耐药株进行全基因组测序共检测到195个单核苷酸多态性(single nucleotide polymorphisma,SNP)突变和19个插入缺失(InDel)突变.结论从亚MIC药物浓度开始,逐渐递增的长期药物刺激能够诱导结核分枝杆菌对氯法齐明的获得性耐药,获得的耐药株耐药性稳定.
目的 利用濃度梯度倍增的氯法齊明(clofazimine,Cfz)體外誘導穫得結覈分枝桿菌(Mycobacterium tuberculosis,Mtb)耐藥株,併進行耐藥機製的初步研究.方法 選取Mtb標準株H37Rv,從亞最低抑菌濃度(subminimal inhibitory concentration,sub-MIC) [1/8 MIC(按照Cfz的MIC值為0.12 μg/ml配置)、1/4 MIC、1/2 MIC …]開始,在Cfz濃度倍增的7H11固體培養基上進行傳代培養,逐步誘導菌株對Cfz的耐藥性,併通過藥物敏感性試驗和全基因組測序來進行驗證;同時利用Alamar blue微闆分析法(microplate Alamar blue assay,MABA)測定誘導耐藥菌株對10種抗結覈藥物(INH、RFP、EMB、Mfx、Lzd、Cs、Cm、TMC207、TBI-166、Cfz)的MIC情況.結果Mtb標準株經誘導後對Cfz的MIC值是誘導前的32～64倍(誘導前Cfz的MIC值是0.12 μg/ml).對10種抗結覈藥物敏感性試驗顯示,Cfz誘導耐藥菌株對TMC207 (Bendaquiline)及TBI-166產生交扠耐藥.耐藥株在7H9液體培養基中進行無藥連續培養10代後,測定其MIC值無明顯變化,MIC數值都穩定在32MIC～64MIC之間,對此誘導耐藥株進行全基因組測序共檢測到195箇單覈苷痠多態性(single nucleotide polymorphisma,SNP)突變和19箇插入缺失(InDel)突變.結論從亞MIC藥物濃度開始,逐漸遞增的長期藥物刺激能夠誘導結覈分枝桿菌對氯法齊明的穫得性耐藥,穫得的耐藥株耐藥性穩定.
목적 이용농도제도배증적록법제명(clofazimine,Cfz)체외유도획득결핵분지간균(Mycobacterium tuberculosis,Mtb)내약주,병진행내약궤제적초보연구.방법 선취Mtb표준주H37Rv,종아최저억균농도(subminimal inhibitory concentration,sub-MIC) [1/8 MIC(안조Cfz적MIC치위0.12 μg/ml배치)、1/4 MIC、1/2 MIC …]개시,재Cfz농도배증적7H11고체배양기상진행전대배양,축보유도균주대Cfz적내약성,병통과약물민감성시험화전기인조측서래진행험증;동시이용Alamar blue미판분석법(microplate Alamar blue assay,MABA)측정유도내약균주대10충항결핵약물(INH、RFP、EMB、Mfx、Lzd、Cs、Cm、TMC207、TBI-166、Cfz)적MIC정황.결과Mtb표준주경유도후대Cfz적MIC치시유도전적32～64배(유도전Cfz적MIC치시0.12 μg/ml).대10충항결핵약물민감성시험현시,Cfz유도내약균주대TMC207 (Bendaquiline)급TBI-166산생교차내약.내약주재7H9액체배양기중진행무약련속배양10대후,측정기MIC치무명현변화,MIC수치도은정재32MIC～64MIC지간,대차유도내약주진행전기인조측서공검측도195개단핵감산다태성(single nucleotide polymorphisma,SNP)돌변화19개삽입결실(InDel)돌변.결론종아MIC약물농도개시,축점체증적장기약물자격능구유도결핵분지간균대록법제명적획득성내약,획득적내약주내약성은정.
