医学研究杂志
醫學研究雜誌
의학연구잡지
JOURNAL OF MEDICAL RESEARCH
2015年
6期
122-126
,共5页
二苯乙烯苷%血小板源性生长因子%肺动脉平滑肌细胞%细胞周期%增殖
二苯乙烯苷%血小闆源性生長因子%肺動脈平滑肌細胞%細胞週期%增殖
이분을희감%혈소판원성생장인자%폐동맥평활기세포%세포주기%증식
2,3,5,4-Tetrahydroxyl diphenylethylene-2-o-glucoside%Platelet-derived growth factor-BB%Pulmonary artery smooth muscle cells%Cell cycle%Proliferation
目的 建立PDGF-BB诱导的原代大鼠肺动脉平滑肌细胞(pulmonary vascular smooth muscle cells,PASMCs)增殖的细胞模型,并探讨二苯乙烯苷(2,3,5,4-tetrahydroxyl diphenylethylene-2-o-glucoside,TSG)对PASMCs增殖的影响及其机制,为肺血管重构防治寻找新药物.方法 采用酶消化法分离培养大鼠原代PASMCs,通过20ng/ml PDGF-BB诱导PASMCs增殖建立细胞模型,采用1 ～ 100μmol/L TSG干预PDGF-BB诱导的PASMCs增殖,通过CCK-8检测PASMCs增殖及TSG的细胞毒作用,BRDU检测DNA的合成,流式细胞仪分析细胞周期,实时定量PCR(RT-PCR)检测CyclinD1、CyclinE、CDK2/4/6 mRNA的表达,Western blot法检测总的和磷酸化AKT/GSK3β的表达.结果 CCK-8检测结果表明TSG抑制PDGF-BB诱导的PASMCs增殖及DNA合成具有浓度依赖性,并且实验浓度的TSG对PASMCs无明显毒性不良反应;流式细胞仪分析结果表明TSG能够阻滞细胞周期于G0/G1～S期,RT-PCR结果表明TSG能够抑制CyclinD1、CyclinE、CDK2/4/6 mRNA的表达;Westernblot法检测结果表明TSG能够抑制AKT/GSK3β活化.结论 TSG通过阻滞细胞周期于G0/G1～S抑制PDGF-BB诱导的PASMCs增殖.TSG抑制PASMCs增殖与抑制AKT/GSK3β信号通路的活化有关.
目的 建立PDGF-BB誘導的原代大鼠肺動脈平滑肌細胞(pulmonary vascular smooth muscle cells,PASMCs)增殖的細胞模型,併探討二苯乙烯苷(2,3,5,4-tetrahydroxyl diphenylethylene-2-o-glucoside,TSG)對PASMCs增殖的影響及其機製,為肺血管重構防治尋找新藥物.方法 採用酶消化法分離培養大鼠原代PASMCs,通過20ng/ml PDGF-BB誘導PASMCs增殖建立細胞模型,採用1 ～ 100μmol/L TSG榦預PDGF-BB誘導的PASMCs增殖,通過CCK-8檢測PASMCs增殖及TSG的細胞毒作用,BRDU檢測DNA的閤成,流式細胞儀分析細胞週期,實時定量PCR(RT-PCR)檢測CyclinD1、CyclinE、CDK2/4/6 mRNA的錶達,Western blot法檢測總的和燐痠化AKT/GSK3β的錶達.結果 CCK-8檢測結果錶明TSG抑製PDGF-BB誘導的PASMCs增殖及DNA閤成具有濃度依賴性,併且實驗濃度的TSG對PASMCs無明顯毒性不良反應;流式細胞儀分析結果錶明TSG能夠阻滯細胞週期于G0/G1～S期,RT-PCR結果錶明TSG能夠抑製CyclinD1、CyclinE、CDK2/4/6 mRNA的錶達;Westernblot法檢測結果錶明TSG能夠抑製AKT/GSK3β活化.結論 TSG通過阻滯細胞週期于G0/G1～S抑製PDGF-BB誘導的PASMCs增殖.TSG抑製PASMCs增殖與抑製AKT/GSK3β信號通路的活化有關.
목적 건립PDGF-BB유도적원대대서폐동맥평활기세포(pulmonary vascular smooth muscle cells,PASMCs)증식적세포모형,병탐토이분을희감(2,3,5,4-tetrahydroxyl diphenylethylene-2-o-glucoside,TSG)대PASMCs증식적영향급기궤제,위폐혈관중구방치심조신약물.방법 채용매소화법분리배양대서원대PASMCs,통과20ng/ml PDGF-BB유도PASMCs증식건립세포모형,채용1 ～ 100μmol/L TSG간예PDGF-BB유도적PASMCs증식,통과CCK-8검측PASMCs증식급TSG적세포독작용,BRDU검측DNA적합성,류식세포의분석세포주기,실시정량PCR(RT-PCR)검측CyclinD1、CyclinE、CDK2/4/6 mRNA적표체,Western blot법검측총적화린산화AKT/GSK3β적표체.결과 CCK-8검측결과표명TSG억제PDGF-BB유도적PASMCs증식급DNA합성구유농도의뢰성,병차실험농도적TSG대PASMCs무명현독성불량반응;류식세포의분석결과표명TSG능구조체세포주기우G0/G1～S기,RT-PCR결과표명TSG능구억제CyclinD1、CyclinE、CDK2/4/6 mRNA적표체;Westernblot법검측결과표명TSG능구억제AKT/GSK3β활화.결론 TSG통과조체세포주기우G0/G1～S억제PDGF-BB유도적PASMCs증식.TSG억제PASMCs증식여억제AKT/GSK3β신호통로적활화유관.
