中国酿造
中國釀造
중국양조
CHINA BREWING
2015年
5期
43-47
,共5页
马腾%赵亚琪%路福平%蔡韬
馬騰%趙亞琪%路福平%蔡韜
마등%조아기%로복평%채도
mCherry报告基因%基因突变文库%筛选%LysR转录调控家族%MsiR
mCherry報告基因%基因突變文庫%篩選%LysR轉錄調控傢族%MsiR
mCherry보고기인%기인돌변문고%사선%LysR전록조공가족%MsiR
mCherry reporter gene%gene mutant library%screening%LysR-type transcriptional regulator%MsiR
外源蛋白在表达宿主中的可溶性是影响其应用的关键因素.采用mCherry报告基因,构建MsiR-mCherry融合蛋白,通过测定荧光值定性定量的测定MsiR蛋白在大肠杆菌中的可溶性表达量.随后,利用易错聚合酶链反应(Errorprone-PCR)和致突变菌株(XL1-Red)两种方式构建了msiR-mCherry基因突变文库,经筛选得到了4株在大肠杆菌中以37℃作为诱导温度下可溶性明显提高的蛋白突变体.
外源蛋白在錶達宿主中的可溶性是影響其應用的關鍵因素.採用mCherry報告基因,構建MsiR-mCherry融閤蛋白,通過測定熒光值定性定量的測定MsiR蛋白在大腸桿菌中的可溶性錶達量.隨後,利用易錯聚閤酶鏈反應(Errorprone-PCR)和緻突變菌株(XL1-Red)兩種方式構建瞭msiR-mCherry基因突變文庫,經篩選得到瞭4株在大腸桿菌中以37℃作為誘導溫度下可溶性明顯提高的蛋白突變體.
외원단백재표체숙주중적가용성시영향기응용적관건인소.채용mCherry보고기인,구건MsiR-mCherry융합단백,통과측정형광치정성정량적측정MsiR단백재대장간균중적가용성표체량.수후,이용역착취합매련반응(Errorprone-PCR)화치돌변균주(XL1-Red)량충방식구건료msiR-mCherry기인돌변문고,경사선득도료4주재대장간균중이37℃작위유도온도하가용성명현제고적단백돌변체.