西部医学
西部醫學
서부의학
MEDICAL JOURNAL OF WEST CHINA
2015年
8期
1131-1134
,共4页
马丽婷%高秀峰%王胤吉%潘佳欣%赵佳皓%阳文龙%李永生
馬麗婷%高秀峰%王胤吉%潘佳訢%趙佳皓%暘文龍%李永生
마려정%고수봉%왕윤길%반가흔%조가호%양문룡%리영생
促红细胞生成素%表达载体构建%原核表达%分离纯化
促紅細胞生成素%錶達載體構建%原覈錶達%分離純化
촉홍세포생성소%표체재체구건%원핵표체%분리순화
Erythropoietin%Expression vector construction%Prokaryotic expression%Separation and purification
目的 构建和表达人源性促红细胞生成素(EPO),为促红细胞生成素发挥功能与结构差异研究做准备.方法 通过NCBI查找人源性促红细胞生成素全基因序列并合成,构建原核表达载体pTWIN1-rhEPO,转化至大肠杆菌BL21 (DE3),获得高效表达重组转化子菌株.结果 成功构建人源性促红细胞生成素原核表达载体,经酶切和DNA序列测序分析,结果表明该基因序列与合成序列完全相同.终浓度0.5mmol/L ITPG诱导表达,SDS-PAGE电泳分析,4小时时蛋白表达量最高.结论 构建和表达重组载体pTWIN1-rhEPO,分离纯化出目的蛋白,为进一步研究促红细胞生成素组织修复功能及突变体相关功能研究奠定基础.
目的 構建和錶達人源性促紅細胞生成素(EPO),為促紅細胞生成素髮揮功能與結構差異研究做準備.方法 通過NCBI查找人源性促紅細胞生成素全基因序列併閤成,構建原覈錶達載體pTWIN1-rhEPO,轉化至大腸桿菌BL21 (DE3),穫得高效錶達重組轉化子菌株.結果 成功構建人源性促紅細胞生成素原覈錶達載體,經酶切和DNA序列測序分析,結果錶明該基因序列與閤成序列完全相同.終濃度0.5mmol/L ITPG誘導錶達,SDS-PAGE電泳分析,4小時時蛋白錶達量最高.結論 構建和錶達重組載體pTWIN1-rhEPO,分離純化齣目的蛋白,為進一步研究促紅細胞生成素組織脩複功能及突變體相關功能研究奠定基礎.
목적 구건화표체인원성촉홍세포생성소(EPO),위촉홍세포생성소발휘공능여결구차이연구주준비.방법 통과NCBI사조인원성촉홍세포생성소전기인서렬병합성,구건원핵표체재체pTWIN1-rhEPO,전화지대장간균BL21 (DE3),획득고효표체중조전화자균주.결과 성공구건인원성촉홍세포생성소원핵표체재체,경매절화DNA서렬측서분석,결과표명해기인서렬여합성서렬완전상동.종농도0.5mmol/L ITPG유도표체,SDS-PAGE전영분석,4소시시단백표체량최고.결론 구건화표체중조재체pTWIN1-rhEPO,분리순화출목적단백,위진일보연구촉홍세포생성소조직수복공능급돌변체상관공능연구전정기출.
