宁夏医科大学学报
寧夏醫科大學學報
저하의과대학학보
JOURNAL OF NINGXIA MEDICAL COLLEGE
2015年
6期
620-625
,共6页
王成泉%王珺%尹磊%夏鹤春
王成泉%王珺%尹磊%夏鶴春
왕성천%왕군%윤뢰%하학춘
Period2%人U343胶质瘤%MDM2%p53
Period2%人U343膠質瘤%MDM2%p53
Period2%인U343효질류%MDM2%p53
Period2%human U343 glioma%MDM2%p53
目的 探讨裸鼠体内Period2(Per2)基因对人U343胶质瘤细胞p53的调控作用及意义.方法 体外培养特异性人Per2基因shRNA慢病毒载体转染细胞(shRNA-Per2组)、非干扰慢病毒载体转染细胞(shRNA-control组)、空白对照U343胶质瘤细胞(空白对照组),分别接种于裸鼠颈后皮下,处于标准饲养环境成瘤.qRT-PCR、Western blot技术分别检测shRNA-Per2组、shRNA-control组、空白对照组中胶质瘤Per2、MDM2、p53、ATM、c-myc的mRNA和蛋白含量.结果 Per2低表达加快裸鼠体内胶质瘤细胞的成瘤及肿瘤的生长,shRNA-Per2组胶质瘤中Per2、p53、ATM的mRNA含量均低于shRNA-control组和空白对照组(P均＜0.05);而MDM2与c-myc的mRNA水平均高于shRNA-control组和空白对照组(P均＜0.05);各个基因的空白对照组与shRNA-control组中mRNA表达差异无统计学意义(P均＞0.05).Western blot结果表明各组裸鼠体内胶质瘤中5种蛋白的表达与上述mRNA呈现相同的趋势.shRNA-Per2组胶质瘤中Per2蛋白表达(0.541±0.0516)低于shRNA-control组(0.854±0.0947)和空白对照组(0.787±0.0913)(P均＜0.05),p53蛋白表达(0.707±0.126)低于shRNA-control组(1.160±0.0717)和空白对照组(1.300±0.105)(P均＜0.05),ATM表达(0.364±0.0309)低于shRNA-control组(0.742 ±0.190)和空白对照组(0.719±0.175)(P均＜0.05),而shRNA-Per2组胶质瘤中MDM2蛋白表达(0.777±0.145)高于shRNA-control组(0.520±0.0634)和空白对照组(0.483±0.096)(P均＜0.05),c-myc蛋白表达(0.522±0.0624)高于shR-NA-control组(0.280±0.0652)和空白对照组(0.237±0.0623)(P均＜0.05).而各个基因在空白对照组与shRNA-control组中相对蛋白表达水平差异无统计学意义(P均＞0.05).结论 在胶质瘤发生发展中Per2基因促进p53和ATM的表达,降低MDM2和c-myc的表达;Per2可视为今后治疗胶质瘤的潜在靶点.
目的 探討裸鼠體內Period2(Per2)基因對人U343膠質瘤細胞p53的調控作用及意義.方法 體外培養特異性人Per2基因shRNA慢病毒載體轉染細胞(shRNA-Per2組)、非榦擾慢病毒載體轉染細胞(shRNA-control組)、空白對照U343膠質瘤細胞(空白對照組),分彆接種于裸鼠頸後皮下,處于標準飼養環境成瘤.qRT-PCR、Western blot技術分彆檢測shRNA-Per2組、shRNA-control組、空白對照組中膠質瘤Per2、MDM2、p53、ATM、c-myc的mRNA和蛋白含量.結果 Per2低錶達加快裸鼠體內膠質瘤細胞的成瘤及腫瘤的生長,shRNA-Per2組膠質瘤中Per2、p53、ATM的mRNA含量均低于shRNA-control組和空白對照組(P均＜0.05);而MDM2與c-myc的mRNA水平均高于shRNA-control組和空白對照組(P均＜0.05);各箇基因的空白對照組與shRNA-control組中mRNA錶達差異無統計學意義(P均＞0.05).Western blot結果錶明各組裸鼠體內膠質瘤中5種蛋白的錶達與上述mRNA呈現相同的趨勢.shRNA-Per2組膠質瘤中Per2蛋白錶達(0.541±0.0516)低于shRNA-control組(0.854±0.0947)和空白對照組(0.787±0.0913)(P均＜0.05),p53蛋白錶達(0.707±0.126)低于shRNA-control組(1.160±0.0717)和空白對照組(1.300±0.105)(P均＜0.05),ATM錶達(0.364±0.0309)低于shRNA-control組(0.742 ±0.190)和空白對照組(0.719±0.175)(P均＜0.05),而shRNA-Per2組膠質瘤中MDM2蛋白錶達(0.777±0.145)高于shRNA-control組(0.520±0.0634)和空白對照組(0.483±0.096)(P均＜0.05),c-myc蛋白錶達(0.522±0.0624)高于shR-NA-control組(0.280±0.0652)和空白對照組(0.237±0.0623)(P均＜0.05).而各箇基因在空白對照組與shRNA-control組中相對蛋白錶達水平差異無統計學意義(P均＞0.05).結論 在膠質瘤髮生髮展中Per2基因促進p53和ATM的錶達,降低MDM2和c-myc的錶達;Per2可視為今後治療膠質瘤的潛在靶點.
목적 탐토라서체내Period2(Per2)기인대인U343효질류세포p53적조공작용급의의.방법 체외배양특이성인Per2기인shRNA만병독재체전염세포(shRNA-Per2조)、비간우만병독재체전염세포(shRNA-control조)、공백대조U343효질류세포(공백대조조),분별접충우라서경후피하,처우표준사양배경성류.qRT-PCR、Western blot기술분별검측shRNA-Per2조、shRNA-control조、공백대조조중효질류Per2、MDM2、p53、ATM、c-myc적mRNA화단백함량.결과 Per2저표체가쾌라서체내효질류세포적성류급종류적생장,shRNA-Per2조효질류중Per2、p53、ATM적mRNA함량균저우shRNA-control조화공백대조조(P균＜0.05);이MDM2여c-myc적mRNA수평균고우shRNA-control조화공백대조조(P균＜0.05);각개기인적공백대조조여shRNA-control조중mRNA표체차이무통계학의의(P균＞0.05).Western blot결과표명각조라서체내효질류중5충단백적표체여상술mRNA정현상동적추세.shRNA-Per2조효질류중Per2단백표체(0.541±0.0516)저우shRNA-control조(0.854±0.0947)화공백대조조(0.787±0.0913)(P균＜0.05),p53단백표체(0.707±0.126)저우shRNA-control조(1.160±0.0717)화공백대조조(1.300±0.105)(P균＜0.05),ATM표체(0.364±0.0309)저우shRNA-control조(0.742 ±0.190)화공백대조조(0.719±0.175)(P균＜0.05),이shRNA-Per2조효질류중MDM2단백표체(0.777±0.145)고우shRNA-control조(0.520±0.0634)화공백대조조(0.483±0.096)(P균＜0.05),c-myc단백표체(0.522±0.0624)고우shR-NA-control조(0.280±0.0652)화공백대조조(0.237±0.0623)(P균＜0.05).이각개기인재공백대조조여shRNA-control조중상대단백표체수평차이무통계학의의(P균＞0.05).결론 재효질류발생발전중Per2기인촉진p53화ATM적표체,강저MDM2화c-myc적표체;Per2가시위금후치료효질류적잠재파점.
