影像科学与光化学
影像科學與光化學
영상과학여광화학
IMAGING SCIENCE AND PHOTOCHEMISTRY
2015年
4期
321-329
,共9页
曹洪玉%王珍%唐乾%郑学仿
曹洪玉%王珍%唐乾%鄭學倣
조홍옥%왕진%당건%정학방
大分子拥挤环境%辣根过氧化物酶%光照还原%光谱法
大分子擁擠環境%辣根過氧化物酶%光照還原%光譜法
대분자옹제배경%랄근과양화물매%광조환원%광보법
macromolecular crowding environment%horseradish peroxidase%photoreduction%spectroscopy
稀溶液中光诱导辣根过氧化物酶(Horseradish Peroxidase,HRP)能够发生还原反应,但这一研究忽略了生物体细胞内因存在各种分子而高度拥挤的真实环境.本文采用紫外可见、荧光、同步荧光及圆二色光谱法,研究了大分子拥挤环境中光诱导HRP的还原过程及外界环境对其光还原的影响.UV-Vis光谱和同步荧光光谱结果表明,采用403 nm单色光照射时,HRP在拥挤试剂葡聚糖70(Dextran70)中还原程度较好,而HRP在聚蔗糖70(Ficoll70)拥挤环境下不发生光还原反应;采用280 nm单色光照射时,在拥挤试剂DextranT0和Ficoll70中HRP光还原反应程度增加,且HRP的光还原程度在Ficoll70溶液中远高于在Dextran70溶液中;光诱导HRP还原的最适温度在Dextran70和Ficoll70环境中分别为4℃和24℃;HRP在Dextran70溶液中的最佳光还原浓度是100 g/L,在Ficoll70环境中HRP还原程度随着Ficoll70浓度的增加而增大;CD光谱结果表明拥挤环境中HRP被光还原后,蛋白的二级结构基本没有变化.
稀溶液中光誘導辣根過氧化物酶(Horseradish Peroxidase,HRP)能夠髮生還原反應,但這一研究忽略瞭生物體細胞內因存在各種分子而高度擁擠的真實環境.本文採用紫外可見、熒光、同步熒光及圓二色光譜法,研究瞭大分子擁擠環境中光誘導HRP的還原過程及外界環境對其光還原的影響.UV-Vis光譜和同步熒光光譜結果錶明,採用403 nm單色光照射時,HRP在擁擠試劑葡聚糖70(Dextran70)中還原程度較好,而HRP在聚蔗糖70(Ficoll70)擁擠環境下不髮生光還原反應;採用280 nm單色光照射時,在擁擠試劑DextranT0和Ficoll70中HRP光還原反應程度增加,且HRP的光還原程度在Ficoll70溶液中遠高于在Dextran70溶液中;光誘導HRP還原的最適溫度在Dextran70和Ficoll70環境中分彆為4℃和24℃;HRP在Dextran70溶液中的最佳光還原濃度是100 g/L,在Ficoll70環境中HRP還原程度隨著Ficoll70濃度的增加而增大;CD光譜結果錶明擁擠環境中HRP被光還原後,蛋白的二級結構基本沒有變化.
희용액중광유도랄근과양화물매(Horseradish Peroxidase,HRP)능구발생환원반응,단저일연구홀략료생물체세포내인존재각충분자이고도옹제적진실배경.본문채용자외가견、형광、동보형광급원이색광보법,연구료대분자옹제배경중광유도HRP적환원과정급외계배경대기광환원적영향.UV-Vis광보화동보형광광보결과표명,채용403 nm단색광조사시,HRP재옹제시제포취당70(Dextran70)중환원정도교호,이HRP재취자당70(Ficoll70)옹제배경하불발생광환원반응;채용280 nm단색광조사시,재옹제시제DextranT0화Ficoll70중HRP광환원반응정도증가,차HRP적광환원정도재Ficoll70용액중원고우재Dextran70용액중;광유도HRP환원적최괄온도재Dextran70화Ficoll70배경중분별위4℃화24℃;HRP재Dextran70용액중적최가광환원농도시100 g/L,재Ficoll70배경중HRP환원정도수착Ficoll70농도적증가이증대;CD광보결과표명옹제배경중HRP피광환원후,단백적이급결구기본몰유변화.
