南方农业学报
南方農業學報
남방농업학보
GUANGXI AGRICULTURAL SCIENCES
2015年
5期
900-904
,共5页
肖贵榜%葛正龙%姜婧怡%张子萍%曾晓英
肖貴榜%葛正龍%薑婧怡%張子萍%曾曉英
초귀방%갈정룡%강청이%장자평%증효영
遵义小钝吻鮠%体表黏液%抗菌肽%分离纯化%抑菌圈直径
遵義小鈍吻鮠%體錶黏液%抗菌肽%分離純化%抑菌圈直徑
준의소둔문외%체표점액%항균태%분리순화%억균권직경
L.microcrassirostris Zunyiensis Xiao sp.nov.%skin mucus%antimicrobial peptides%separation and purification%antibacterial circle diameter
[目的]从遵义小钝吻鮠(Leioxassis microcrassirostris Zunyiensis Xiao sp.nov.)体表黏液中获取高质量的抗菌肽,为提高其先天免疫能力及病害防治效果奠定基础.[方法]采用物理方法收集遵义小钝吻鮠的体表黏液,以5％乙酸进行浸提,采用SephadexG-50和SephadexG-25两步凝胶层析技术对抗菌粗提物进行分离纯化,结合Tricine-SDS-PAGE电泳法进行分离鉴定,并运用牛津杯法和挖孔法进行抑菌试验.[结果]遵义小钝吻鮠体表黏液经乙酸法浸提处理并冷冻干燥,其粗提物呈白色粉末,稀释液蛋白质含量为1755 μg/mL;经SephadexG-50凝胶层析分离,其纯化产物抑菌活性峰主要在峰Ⅱ和峰Ⅲ,抑菌圈直径11.66 mm;再经SephadexG-25凝胶层析分离纯化后出现单一活性峰,其产物为分子量小于4.1kD的抗菌肽,抑菌圈直径12.85mm.[结论]遵义小钝吻鮠无需诱导刺激,可直接采用物理方法收集其体表黏液,以5％乙酸浸提后经SephadexG-50和SephadexG-25两步凝胶层析便可分离出纯度较高的抗菌肽.
[目的]從遵義小鈍吻鮠(Leioxassis microcrassirostris Zunyiensis Xiao sp.nov.)體錶黏液中穫取高質量的抗菌肽,為提高其先天免疫能力及病害防治效果奠定基礎.[方法]採用物理方法收集遵義小鈍吻鮠的體錶黏液,以5％乙痠進行浸提,採用SephadexG-50和SephadexG-25兩步凝膠層析技術對抗菌粗提物進行分離純化,結閤Tricine-SDS-PAGE電泳法進行分離鑒定,併運用牛津杯法和挖孔法進行抑菌試驗.[結果]遵義小鈍吻鮠體錶黏液經乙痠法浸提處理併冷凍榦燥,其粗提物呈白色粉末,稀釋液蛋白質含量為1755 μg/mL;經SephadexG-50凝膠層析分離,其純化產物抑菌活性峰主要在峰Ⅱ和峰Ⅲ,抑菌圈直徑11.66 mm;再經SephadexG-25凝膠層析分離純化後齣現單一活性峰,其產物為分子量小于4.1kD的抗菌肽,抑菌圈直徑12.85mm.[結論]遵義小鈍吻鮠無需誘導刺激,可直接採用物理方法收集其體錶黏液,以5％乙痠浸提後經SephadexG-50和SephadexG-25兩步凝膠層析便可分離齣純度較高的抗菌肽.
[목적]종준의소둔문외(Leioxassis microcrassirostris Zunyiensis Xiao sp.nov.)체표점액중획취고질량적항균태,위제고기선천면역능력급병해방치효과전정기출.[방법]채용물리방법수집준의소둔문외적체표점액,이5％을산진행침제,채용SephadexG-50화SephadexG-25량보응효층석기술대항균조제물진행분리순화,결합Tricine-SDS-PAGE전영법진행분리감정,병운용우진배법화알공법진행억균시험.[결과]준의소둔문외체표점액경을산법침제처리병냉동간조,기조제물정백색분말,희석액단백질함량위1755 μg/mL;경SephadexG-50응효층석분리,기순화산물억균활성봉주요재봉Ⅱ화봉Ⅲ,억균권직경11.66 mm;재경SephadexG-25응효층석분리순화후출현단일활성봉,기산물위분자량소우4.1kD적항균태,억균권직경12.85mm.[결론]준의소둔문외무수유도자격,가직접채용물리방법수집기체표점액,이5％을산침제후경SephadexG-50화SephadexG-25량보응효층석편가분리출순도교고적항균태.
