CAJ | 학술논문

为了进一步评价 E ．coli OmpF的功能，我们构建了 E ．coli外膜蛋白F的缺失突变株。首先根据 E ．coli F‐M‐2的测序后的OmpF基因序列设计PCR敲除引物，引物5’端分别有50 bp和48 bp的拟敲除基因的同源臂，3’端为扩增引物，以pKD3为模板，扩增两侧含FRT位点的氯霉素抗性基因，然后利用pKD46的λ‐Red重组系统替换 E ．coli F‐M‐2基因组上的OmpF基因，再利用表达FLP重组酶的质粒pCP20将FRT位点之间的氯霉素抗性基因删除，最后用鉴定引物进行鉴定并测序。结果成功地构建了云南撒坝猪致病性 E ．coli OmpF缺失突变株。
위료진일보평개 E ．coli OmpF적공능，아문구건료 E ．coli외막단백F적결실돌변주。수선근거 E ．coli F‐M‐2적측서후적OmpF기인서렬설계PCR고제인물，인물5’단분별유50 bp화48 bp적의고제기인적동원비，3’단위확증인물，이pKD3위모판，확증량측함FRT위점적록매소항성기인，연후이용pKD46적λ‐Red중조계통체환 E ．coli F‐M‐2기인조상적OmpF기인，재이용표체FLP중조매적질립pCP20장FRT위점지간적록매소항성기인산제，최후용감정인물진행감정병측서。결과성공지구건료운남살패저치병성 E ．coli OmpF결실돌변주。