CAJ | 학술논문

为了建立一种快速的鸡马立克氏病血清1型病毒（MDV‐1）病原检测方法，试验采用针对MDV‐1基因序列保守区域设计1对特异性引物和1条特异性的探针，通过构建重组阳性标准质粒的方法，构建重组质粒作为阳性标准品，建立了检测MDV‐1核酸的荧光定量PCR方法。优化反应体系和条件后进行特异性、敏感性、重复性试验。结果显示，该检测方法特异性强，与其它禽源病毒如新城疫病毒（NDV）、禽流感病毒（AIV）、传染性支气管炎病毒（IBV）、传染性法氏囊病病毒（IBDV）、鸡传染性贫血病毒（CIAV）和J亚群禽白血病病毒（ALV‐J）均不发生交叉反应；该方法可检测到4．6×101拷贝／mL的病毒核酸，与常规PC R相比，敏感性高100倍；重复性试验的变异系数小于2％。研究结果表明所建立的Real‐time PCR检测方法特异性强、灵敏度高、可重复性好，可用于M DV‐1的定量检测。
위료건립일충쾌속적계마립극씨병혈청1형병독（MDV‐1）병원검측방법，시험채용침대MDV‐1기인서렬보수구역설계1대특이성인물화1조특이성적탐침，통과구건중조양성표준질립적방법，구건중조질립작위양성표준품，건립료검측MDV‐1핵산적형광정량PCR방법。우화반응체계화조건후진행특이성、민감성、중복성시험。결과현시，해검측방법특이성강，여기타금원병독여신성역병독（NDV）、금류감병독（AIV）、전염성지기관염병독（IBV）、전염성법씨낭병병독（IBDV）、계전염성빈혈병독（CIAV）화J아군금백혈병병독（ALV‐J）균불발생교차반응；해방법가검측도4．6×101고패／mL적병독핵산，여상규PC R상비，민감성고100배；중복성시험적변이계수소우2％。연구결과표명소건립적Real‐time PCR검측방법특이성강、령민도고、가중복성호，가용우M DV‐1적정량검측。