生态毒理学报
生態毒理學報
생태독이학보
ASIAN JOURNAL OF ECOTOXICOLOGY
2015年
3期
101-111
,共11页
郭辰%毕婷婷%陈世杰%赵晓红%刘涛%孙健
郭辰%畢婷婷%陳世傑%趙曉紅%劉濤%孫健
곽신%필정정%진세걸%조효홍%류도%손건
细颗粒物(PM2.5)%天然活性物质%细胞毒性%氧化应激%Akt信号通路%NF-κB信号通路%Bad蛋白
細顆粒物(PM2.5)%天然活性物質%細胞毒性%氧化應激%Akt信號通路%NF-κB信號通路%Bad蛋白
세과립물(PM2.5)%천연활성물질%세포독성%양화응격%Akt신호통로%NF-κB신호통로%Bad단백
fine particulate matter(PM2.5)%bioactive compounds%cytotoxicity%oxidative stress (ROS)%Aktsignal pathway%NF-κBsignal pathway%Bad protein
PM2.5引起的健康危害日益受到广泛关注,但其确切的损伤机理仍不完全清楚,目前也缺乏有效拮抗PM2.5损伤的天然活性物质.因此本文对北京市PM2.5造成CHO细胞的损伤作用及天然物质的拮抗作用进行研究,结果可为PM2.5污染治理和疾病的预防提供科学依据.通过CCK-8法测定细胞存活率;通过流式细胞仪测定细胞凋亡;用荧光探针DCFH-DA法测定ROS;提取细胞内总蛋白并测定其中SOD含量;以及通过Western Blot法分别测定了p-akt/akt、p65及Bad的相对表达量.结果显示:(1)10～40μg·mL-1的PM2.5可明显降低CHO细胞存活率,并呈现极显著的剂量-效应关系(r=-0.964,K0.01);15 μg·mL-1 PM2.5可以显著增加细胞凋亡、引起细胞内ROS增加、SOD含量下降;p-akt/akt、p65表达量增加说明Akt通路与NF-κB通路均被激活.(2) 20 μmol·L-1阿魏酸、50 μmol L-1绿原酸和10μmol· L-1荭草素预处理可拮抗PM2.5引起的细胞存活率下降以及细胞凋亡率增加,同时降低细胞内ROS并增加SOD含量,下调p-akt/akt、p65及Bad的相对表达量.其中20 μmol·L-1阿魏酸的保护作用最佳.结果说明,PM2.5引起的CHO细胞损伤与细胞凋亡与Akt和NF-κB通路的激活有关;三种天然活性物质具有拮抗PM2.5造成的细胞损伤的能力,其保护机理是通过其降低PM2.5引起的细胞内氧化应激反应,进而降低被PM2.5激活的Akt通路与NF-κB通路和下调Bad蛋白表达量来实现的.
PM2.5引起的健康危害日益受到廣汎關註,但其確切的損傷機理仍不完全清楚,目前也缺乏有效拮抗PM2.5損傷的天然活性物質.因此本文對北京市PM2.5造成CHO細胞的損傷作用及天然物質的拮抗作用進行研究,結果可為PM2.5汙染治理和疾病的預防提供科學依據.通過CCK-8法測定細胞存活率;通過流式細胞儀測定細胞凋亡;用熒光探針DCFH-DA法測定ROS;提取細胞內總蛋白併測定其中SOD含量;以及通過Western Blot法分彆測定瞭p-akt/akt、p65及Bad的相對錶達量.結果顯示:(1)10～40μg·mL-1的PM2.5可明顯降低CHO細胞存活率,併呈現極顯著的劑量-效應關繫(r=-0.964,K0.01);15 μg·mL-1 PM2.5可以顯著增加細胞凋亡、引起細胞內ROS增加、SOD含量下降;p-akt/akt、p65錶達量增加說明Akt通路與NF-κB通路均被激活.(2) 20 μmol·L-1阿魏痠、50 μmol L-1綠原痠和10μmol· L-1葒草素預處理可拮抗PM2.5引起的細胞存活率下降以及細胞凋亡率增加,同時降低細胞內ROS併增加SOD含量,下調p-akt/akt、p65及Bad的相對錶達量.其中20 μmol·L-1阿魏痠的保護作用最佳.結果說明,PM2.5引起的CHO細胞損傷與細胞凋亡與Akt和NF-κB通路的激活有關;三種天然活性物質具有拮抗PM2.5造成的細胞損傷的能力,其保護機理是通過其降低PM2.5引起的細胞內氧化應激反應,進而降低被PM2.5激活的Akt通路與NF-κB通路和下調Bad蛋白錶達量來實現的.
PM2.5인기적건강위해일익수도엄범관주,단기학절적손상궤리잉불완전청초,목전야결핍유효길항PM2.5손상적천연활성물질.인차본문대북경시PM2.5조성CHO세포적손상작용급천연물질적길항작용진행연구,결과가위PM2.5오염치리화질병적예방제공과학의거.통과CCK-8법측정세포존활솔;통과류식세포의측정세포조망;용형광탐침DCFH-DA법측정ROS;제취세포내총단백병측정기중SOD함량;이급통과Western Blot법분별측정료p-akt/akt、p65급Bad적상대표체량.결과현시:(1)10～40μg·mL-1적PM2.5가명현강저CHO세포존활솔,병정현겁현저적제량-효응관계(r=-0.964,K0.01);15 μg·mL-1 PM2.5가이현저증가세포조망、인기세포내ROS증가、SOD함량하강;p-akt/akt、p65표체량증가설명Akt통로여NF-κB통로균피격활.(2) 20 μmol·L-1아위산、50 μmol L-1록원산화10μmol· L-1홍초소예처리가길항PM2.5인기적세포존활솔하강이급세포조망솔증가,동시강저세포내ROS병증가SOD함량,하조p-akt/akt、p65급Bad적상대표체량.기중20 μmol·L-1아위산적보호작용최가.결과설명,PM2.5인기적CHO세포손상여세포조망여Akt화NF-κB통로적격활유관;삼충천연활성물질구유길항PM2.5조성적세포손상적능력,기보호궤리시통과기강저PM2.5인기적세포내양화응격반응,진이강저피PM2.5격활적Akt통로여NF-κB통로화하조Bad단백표체량래실현적.
