畜牧与兽医
畜牧與獸醫
축목여수의
ANIMAL HUSBANDRY & VETERINARY MEDICINE
2015年
8期
66-69
,共4页
小反刍兽疫病毒F蛋白%杆状病毒%表达%免疫原性
小反芻獸疫病毒F蛋白%桿狀病毒%錶達%免疫原性
소반추수역병독F단백%간상병독%표체%면역원성
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利用Bac-to-Bac杆状病毒昆虫表达系统,构建含有小反刍兽疫病毒(PPRV)F基因的重组质粒F-pFastBac HTA,转化大肠杆菌DH10Bac感受态细胞,得到重组穿梭质粒F-Bacmid,转染昆虫Sf9细胞,获得含有PPRV F基因的重组杆状病毒.用重组病毒感染昆虫细胞后,SDS-PAGE鉴定出59 ku左右的表达蛋白,Western blot与间接免疫荧光试验(IFA)检测该蛋白具有很好的反应原性.通过免疫BALB/c小鼠,ELISA结果证明F蛋白可以诱导产生高水平的血清抗体;MTT试验结果显示F蛋白能刺激T淋巴细胞增殖;说明表达的F蛋白具有良好的免疫原性.以上研究结果为小反刍兽疫病毒的检测方法及亚单位疫苗的研究奠定基础.
利用Bac-to-Bac桿狀病毒昆蟲錶達繫統,構建含有小反芻獸疫病毒(PPRV)F基因的重組質粒F-pFastBac HTA,轉化大腸桿菌DH10Bac感受態細胞,得到重組穿梭質粒F-Bacmid,轉染昆蟲Sf9細胞,穫得含有PPRV F基因的重組桿狀病毒.用重組病毒感染昆蟲細胞後,SDS-PAGE鑒定齣59 ku左右的錶達蛋白,Western blot與間接免疫熒光試驗(IFA)檢測該蛋白具有很好的反應原性.通過免疫BALB/c小鼠,ELISA結果證明F蛋白可以誘導產生高水平的血清抗體;MTT試驗結果顯示F蛋白能刺激T淋巴細胞增殖;說明錶達的F蛋白具有良好的免疫原性.以上研究結果為小反芻獸疫病毒的檢測方法及亞單位疫苗的研究奠定基礎.
이용Bac-to-Bac간상병독곤충표체계통,구건함유소반추수역병독(PPRV)F기인적중조질립F-pFastBac HTA,전화대장간균DH10Bac감수태세포,득도중조천사질립F-Bacmid,전염곤충Sf9세포,획득함유PPRV F기인적중조간상병독.용중조병독감염곤충세포후,SDS-PAGE감정출59 ku좌우적표체단백,Western blot여간접면역형광시험(IFA)검측해단백구유흔호적반응원성.통과면역BALB/c소서,ELISA결과증명F단백가이유도산생고수평적혈청항체;MTT시험결과현시F단백능자격T림파세포증식;설명표체적F단백구유량호적면역원성.이상연구결과위소반추수역병독적검측방법급아단위역묘적연구전정기출.
