东南大学学报（医学版）
東南大學學報（醫學版）
동남대학학보（의학판）
JOURNAL OF SOUTHEAST UNIVERSITY(MEDICAL SCIENCE EDITION)
2015年
4期
531-535
,共5页
沈旭%蒋赞利%吴小涛%张晓峰%谢鑫荟%肖倩茹%黄宁平%王野
瀋旭%蔣讚利%吳小濤%張曉峰%謝鑫薈%肖倩茹%黃寧平%王野
침욱%장찬리%오소도%장효봉%사흠회%초천여%황저평%왕야
骨髓间充质干细胞%聚羟基丁酸戊酸共聚酯纳米材料%神经干细胞%大鼠
骨髓間充質榦細胞%聚羥基丁痠戊痠共聚酯納米材料%神經榦細胞%大鼠
골수간충질간세포%취간기정산무산공취지납미재료%신경간세포%대서
bone marrow stromal cells%PHBV nanomaterials%neural stem cells%rats
目的：探究聚羟基丁酸戊酸共聚酯（ PHBV）纳米材料对大鼠间充质细胞向神经干细胞分化的影响，为PHBV纳米材料与骨髓间充质干细胞（ BMSCs）联合移植治疗脊髓损伤提供新的依据。方法：采用贴壁分离培养的方法分离纯化大鼠BMSC，传至3～4代后接种至PHBV纳米纤维膜（定向与非定向）上，以接种至玻片上为对照组，倒置显微镜下观察对照组细胞形态，待细胞与PHBV纳米纤维膜融合（24 h ）后，以维甲酸（ RA）作为增殖及分化诱导因子对BMSCs进行增殖培养、分化诱导，1周后，实验组采用4％多聚甲醛固定，应用电镜观察细胞形态，用Nestin抗体免疫细胞化学染色鉴定神经干细胞。结果：BMSCs与PHBV纳米纤维膜有很好的相容性，加入RA诱导剂72 h 后细胞形态开始变化，胞体开始回缩，突起逐渐伸出。电镜观察下定向PHBV组的神经元样细胞被显著拉长，并且细胞沿定向纤维的方向伸展，非定向PHBV组与对照组的神经细胞则无明显的拉长状态。免疫荧光染色验证均有Nestin阳性细胞表达。结论：定向纳米纤维通过引导细胞骨架延伸从而对细胞形貌产生显著影响。与非定向纳米纤维相比，神经元样细胞在定向纳米纤维表面被显著拉长。因此，我们认为定向纳米纤维支架可能在神经组织工程中更有优势。
目的：探究聚羥基丁痠戊痠共聚酯（ PHBV）納米材料對大鼠間充質細胞嚮神經榦細胞分化的影響，為PHBV納米材料與骨髓間充質榦細胞（ BMSCs）聯閤移植治療脊髓損傷提供新的依據。方法：採用貼壁分離培養的方法分離純化大鼠BMSC，傳至3～4代後接種至PHBV納米纖維膜（定嚮與非定嚮）上，以接種至玻片上為對照組，倒置顯微鏡下觀察對照組細胞形態，待細胞與PHBV納米纖維膜融閤（24 h ）後，以維甲痠（ RA）作為增殖及分化誘導因子對BMSCs進行增殖培養、分化誘導，1週後，實驗組採用4％多聚甲醛固定，應用電鏡觀察細胞形態，用Nestin抗體免疫細胞化學染色鑒定神經榦細胞。結果：BMSCs與PHBV納米纖維膜有很好的相容性，加入RA誘導劑72 h 後細胞形態開始變化，胞體開始迴縮，突起逐漸伸齣。電鏡觀察下定嚮PHBV組的神經元樣細胞被顯著拉長，併且細胞沿定嚮纖維的方嚮伸展，非定嚮PHBV組與對照組的神經細胞則無明顯的拉長狀態。免疫熒光染色驗證均有Nestin暘性細胞錶達。結論：定嚮納米纖維通過引導細胞骨架延伸從而對細胞形貌產生顯著影響。與非定嚮納米纖維相比，神經元樣細胞在定嚮納米纖維錶麵被顯著拉長。因此，我們認為定嚮納米纖維支架可能在神經組織工程中更有優勢。
목적：탐구취간기정산무산공취지（ PHBV）납미재료대대서간충질세포향신경간세포분화적영향，위PHBV납미재료여골수간충질간세포（ BMSCs）연합이식치료척수손상제공신적의거。방법：채용첩벽분리배양적방법분리순화대서BMSC，전지3～4대후접충지PHBV납미섬유막（정향여비정향）상，이접충지파편상위대조조，도치현미경하관찰대조조세포형태，대세포여PHBV납미섬유막융합（24 h ）후，이유갑산（ RA）작위증식급분화유도인자대BMSCs진행증식배양、분화유도，1주후，실험조채용4％다취갑철고정，응용전경관찰세포형태，용Nestin항체면역세포화학염색감정신경간세포。결과：BMSCs여PHBV납미섬유막유흔호적상용성，가입RA유도제72 h 후세포형태개시변화，포체개시회축，돌기축점신출。전경관찰하정향PHBV조적신경원양세포피현저랍장，병차세포연정향섬유적방향신전，비정향PHBV조여대조조적신경세포칙무명현적랍장상태。면역형광염색험증균유Nestin양성세포표체。결론：정향납미섬유통과인도세포골가연신종이대세포형모산생현저영향。여비정향납미섬유상비，신경원양세포재정향납미섬유표면피현저랍장。인차，아문인위정향납미섬유지가가능재신경조직공정중경유우세。
Objective:To investigate the impact of PHBV nanomaterials on differentiation of bone marrow stromal cells ( BMSCs) into neural stem cells, and to provide a new basis for the treatment of spinal cord injury with combined transplantation containing BMSCs and PHBV.Methods:BMSCs derived from rat bone marrow were used to investigate the effects of aligned(A-NF)and random—oriented(NF) PHBV nanomaterials on cell adhesion and differentiation in vitro, SEM was used to observe BMSCs.Results:After six days of adding in the RA medium,we can see cells extend along with the direction of orientation of the fibers.Neural stem cells were detected with immunostaining for Nestin.Conclusion:The A-NF PHBV has a significant effect on cell morphology by guiding the cytoskeleton extending,neural stem cells are significantly elongated on the surface of the A-NF PHBV compared with the NF PHBV.
