华南农业大学学报
華南農業大學學報
화남농업대학학보
JOURNAL OF SOUTH CHINA AGRICULTURAL UNIVERSITY
2015年
4期
11-15
,共5页
吉艺宽%王雨%程艺%张宝石%向柯宇%琚春梅
吉藝寬%王雨%程藝%張寶石%嚮柯宇%琚春梅
길예관%왕우%정예%장보석%향가우%거춘매
伪狂犬病毒%gE基因%抗原表位区%原核表达%gE184-ELISA
偽狂犬病毒%gE基因%抗原錶位區%原覈錶達%gE184-ELISA
위광견병독%gE기인%항원표위구%원핵표체%gE184-ELISA
pseudorabies virus%gE gene%antigen epitope%prokaryotic expression%gE184-ELISA
[目的]为了区分伪狂犬病病毒疫苗免疫猪和自然感染猪,建立快速诊断的方法.[方法]利用PCR方法从伪狂犬病病毒中扩增出糖蛋白E(gE)基因的主要抗原表位区,用BamH Ⅰ和Hind Ⅲ双酶切后,插入原核表达载体pET-32a(+)中,构建重组表达质粒pET-gE184,并转化至大肠埃希菌Escherichia coli BL21(DE3),经IPTG诱导后进行SDS-PAGE电泳和Western-blot检测,用纯化后的gE184蛋白作为包被抗原,建立间接gE184-ELISA检测方法.[结果和结论]用该方法检测290份临床猪血清样本,并与商品化ELISA试剂盒检测结果比较,两者的符合率为93.1％.
[目的]為瞭區分偽狂犬病病毒疫苗免疫豬和自然感染豬,建立快速診斷的方法.[方法]利用PCR方法從偽狂犬病病毒中擴增齣糖蛋白E(gE)基因的主要抗原錶位區,用BamH Ⅰ和Hind Ⅲ雙酶切後,插入原覈錶達載體pET-32a(+)中,構建重組錶達質粒pET-gE184,併轉化至大腸埃希菌Escherichia coli BL21(DE3),經IPTG誘導後進行SDS-PAGE電泳和Western-blot檢測,用純化後的gE184蛋白作為包被抗原,建立間接gE184-ELISA檢測方法.[結果和結論]用該方法檢測290份臨床豬血清樣本,併與商品化ELISA試劑盒檢測結果比較,兩者的符閤率為93.1％.
[목적]위료구분위광견병병독역묘면역저화자연감염저,건립쾌속진단적방법.[방법]이용PCR방법종위광견병병독중확증출당단백E(gE)기인적주요항원표위구,용BamH Ⅰ화Hind Ⅲ쌍매절후,삽입원핵표체재체pET-32a(+)중,구건중조표체질립pET-gE184,병전화지대장애희균Escherichia coli BL21(DE3),경IPTG유도후진행SDS-PAGE전영화Western-blot검측,용순화후적gE184단백작위포피항원,건립간접gE184-ELISA검측방법.[결과화결론]용해방법검측290빈림상저혈청양본,병여상품화ELISA시제합검측결과비교,량자적부합솔위93.1％.
