实用肝脏病杂志
實用肝髒病雜誌
실용간장병잡지
JOURNAL OF CLINICAL HEPATOLOGY
2015年
4期
344-347
,共4页
王军%李光明%仝艳艳%邓怡林%吴劼%范建高
王軍%李光明%仝豔豔%鄧怡林%吳劼%範建高
왕군%리광명%동염염%산이림%오할%범건고
肝星状细胞%异喹啉类化合物%凋亡%凋亡小体
肝星狀細胞%異喹啉類化閤物%凋亡%凋亡小體
간성상세포%이규람류화합물%조망%조망소체
Hepatic stellate cells%Isoquinoline compound%Apoptosis,Apoptosis body
目的 探讨新型异喹啉类化合物12-4-Y[1-乙基-8-甲氧基-5苯基吡唑并(5,1-a)异喹啉]对大鼠肝星状细胞(HSC)凋亡的影响,并探讨其可能的机制.方法 以不同浓度(5、10、20、40和80 μg/ml)12-4-Y处理HSC-T6细胞,分别于孵育后12h、24h、36h和48h收集细胞,以MTT法检测细胞增殖,以Hoechst染色对凋亡定性,以流式细胞分析对凋亡定量,应用Western blot检测凋亡关键蛋白Caspase3表达变化.结果 12-4-Y处理12h可浓度依赖性(在5～80μg/ml范围内)抑制HSC-T6细胞增殖,细胞增殖率分别为(1.086 ±0.013)、(1.055 ±0.019)、(0.957±0.012)、(0.793±0.021)和(0.553±0.031),均显著高于对照组水平(1.215 ±0.014,P＜0.05);12-4-Y(20μg/ml)处理可时间依赖性抑制HSC-T6细胞增殖,在12 h、24 h、36 h、48 h,细胞增殖率分别为(0.957±0.012)、(0.852±0.024)、(0.641±0.032)和(0.492±0.017),与对照组(1.318±0.007,P＜0.01)差异具有显著性;12-4-Y(20μg/ml)处理24h时,Hoechst染色显示HSC-T6可见明显凋亡小体,流式细胞分析显示凋亡率为(29.23±1.20)％,显著高于对照组[(5.47±1.39)％,P＜0.001];蛋白质印迹显示凋亡关键蛋白Caspase3的裂解产物表达亦显著增加.结论 新型异喹啉类化合物12-4-Y可显著诱导活化HSC凋亡,其机制与激活凋亡关键蛋白Caspase3有关.
目的 探討新型異喹啉類化閤物12-4-Y[1-乙基-8-甲氧基-5苯基吡唑併(5,1-a)異喹啉]對大鼠肝星狀細胞(HSC)凋亡的影響,併探討其可能的機製.方法 以不同濃度(5、10、20、40和80 μg/ml)12-4-Y處理HSC-T6細胞,分彆于孵育後12h、24h、36h和48h收集細胞,以MTT法檢測細胞增殖,以Hoechst染色對凋亡定性,以流式細胞分析對凋亡定量,應用Western blot檢測凋亡關鍵蛋白Caspase3錶達變化.結果 12-4-Y處理12h可濃度依賴性(在5～80μg/ml範圍內)抑製HSC-T6細胞增殖,細胞增殖率分彆為(1.086 ±0.013)、(1.055 ±0.019)、(0.957±0.012)、(0.793±0.021)和(0.553±0.031),均顯著高于對照組水平(1.215 ±0.014,P＜0.05);12-4-Y(20μg/ml)處理可時間依賴性抑製HSC-T6細胞增殖,在12 h、24 h、36 h、48 h,細胞增殖率分彆為(0.957±0.012)、(0.852±0.024)、(0.641±0.032)和(0.492±0.017),與對照組(1.318±0.007,P＜0.01)差異具有顯著性;12-4-Y(20μg/ml)處理24h時,Hoechst染色顯示HSC-T6可見明顯凋亡小體,流式細胞分析顯示凋亡率為(29.23±1.20)％,顯著高于對照組[(5.47±1.39)％,P＜0.001];蛋白質印跡顯示凋亡關鍵蛋白Caspase3的裂解產物錶達亦顯著增加.結論 新型異喹啉類化閤物12-4-Y可顯著誘導活化HSC凋亡,其機製與激活凋亡關鍵蛋白Caspase3有關.
목적 탐토신형이규람류화합물12-4-Y[1-을기-8-갑양기-5분기필서병(5,1-a)이규람]대대서간성상세포(HSC)조망적영향,병탐토기가능적궤제.방법 이불동농도(5、10、20、40화80 μg/ml)12-4-Y처리HSC-T6세포,분별우부육후12h、24h、36h화48h수집세포,이MTT법검측세포증식,이Hoechst염색대조망정성,이류식세포분석대조망정량,응용Western blot검측조망관건단백Caspase3표체변화.결과 12-4-Y처리12h가농도의뢰성(재5～80μg/ml범위내)억제HSC-T6세포증식,세포증식솔분별위(1.086 ±0.013)、(1.055 ±0.019)、(0.957±0.012)、(0.793±0.021)화(0.553±0.031),균현저고우대조조수평(1.215 ±0.014,P＜0.05);12-4-Y(20μg/ml)처리가시간의뢰성억제HSC-T6세포증식,재12 h、24 h、36 h、48 h,세포증식솔분별위(0.957±0.012)、(0.852±0.024)、(0.641±0.032)화(0.492±0.017),여대조조(1.318±0.007,P＜0.01)차이구유현저성;12-4-Y(20μg/ml)처리24h시,Hoechst염색현시HSC-T6가견명현조망소체,류식세포분석현시조망솔위(29.23±1.20)％,현저고우대조조[(5.47±1.39)％,P＜0.001];단백질인적현시조망관건단백Caspase3적렬해산물표체역현저증가.결론 신형이규람류화합물12-4-Y가현저유도활화HSC조망,기궤제여격활조망관건단백Caspase3유관.
