实用肝脏病杂志
實用肝髒病雜誌
실용간장병잡지
JOURNAL OF CLINICAL HEPATOLOGY
2015年
4期
340-343
,共4页
肝星状细胞%小分子干扰RNA%高迁移率族蛋白B1%胶原
肝星狀細胞%小分子榦擾RNA%高遷移率族蛋白B1%膠原
간성상세포%소분자간우RNA%고천이솔족단백B1%효원
Hepatic stellate cells%Small interfering RNA%High mobility group box chromosomal protein 1%Collagen
目的 研究小分子干扰RNA(siRNA)干扰高迁移率族蛋白B1(HMGB l)表达对肝星状细胞(HSC)Ⅰ型和Ⅲ型胶原表达的影响.方法 将化学合成的HMGB 1基因特异性siRNA以脂质体包裹,转染HSC-T6细胞,设阴性对照和空白对照,抽提细胞总RNA和蛋白质,采用Western blot法检测细胞Ⅰ型和Ⅲ型胶原表达情况;采用细胞免疫荧光法检测Ⅰ型和Ⅲ型胶原表达与定位;采用酶联免疫吸附法检测培养上清液中Ⅰ型和Ⅲ型胶原水平.结果 转染HMGB l基因特异性siRNA的HSC-T6细胞Ⅰ型和Ⅲ型胶原蛋白水平显著下调,免疫细胞化学检测也提示转染siRNA后细胞内Ⅰ型和Ⅲ型胶原水平较对照组明显降低;在培养72 h时,上清液Ⅰ型胶原和Ⅲ型胶原水平分别较对照组下降了(46.36±3.82)％和(41.92±3.58) ％(F=33.14,P＜0.01;F=27.56,P＜0.01).结论 HMGB 1特异性siRNA能高效抑制HSC-T6细胞胶原的合成和分泌,因而可能具有预防和治疗肝纤维化的潜力.
目的 研究小分子榦擾RNA(siRNA)榦擾高遷移率族蛋白B1(HMGB l)錶達對肝星狀細胞(HSC)Ⅰ型和Ⅲ型膠原錶達的影響.方法 將化學閤成的HMGB 1基因特異性siRNA以脂質體包裹,轉染HSC-T6細胞,設陰性對照和空白對照,抽提細胞總RNA和蛋白質,採用Western blot法檢測細胞Ⅰ型和Ⅲ型膠原錶達情況;採用細胞免疫熒光法檢測Ⅰ型和Ⅲ型膠原錶達與定位;採用酶聯免疫吸附法檢測培養上清液中Ⅰ型和Ⅲ型膠原水平.結果 轉染HMGB l基因特異性siRNA的HSC-T6細胞Ⅰ型和Ⅲ型膠原蛋白水平顯著下調,免疫細胞化學檢測也提示轉染siRNA後細胞內Ⅰ型和Ⅲ型膠原水平較對照組明顯降低;在培養72 h時,上清液Ⅰ型膠原和Ⅲ型膠原水平分彆較對照組下降瞭(46.36±3.82)％和(41.92±3.58) ％(F=33.14,P＜0.01;F=27.56,P＜0.01).結論 HMGB 1特異性siRNA能高效抑製HSC-T6細胞膠原的閤成和分泌,因而可能具有預防和治療肝纖維化的潛力.
목적 연구소분자간우RNA(siRNA)간우고천이솔족단백B1(HMGB l)표체대간성상세포(HSC)Ⅰ형화Ⅲ형효원표체적영향.방법 장화학합성적HMGB 1기인특이성siRNA이지질체포과,전염HSC-T6세포,설음성대조화공백대조,추제세포총RNA화단백질,채용Western blot법검측세포Ⅰ형화Ⅲ형효원표체정황;채용세포면역형광법검측Ⅰ형화Ⅲ형효원표체여정위;채용매련면역흡부법검측배양상청액중Ⅰ형화Ⅲ형효원수평.결과 전염HMGB l기인특이성siRNA적HSC-T6세포Ⅰ형화Ⅲ형효원단백수평현저하조,면역세포화학검측야제시전염siRNA후세포내Ⅰ형화Ⅲ형효원수평교대조조명현강저;재배양72 h시,상청액Ⅰ형효원화Ⅲ형효원수평분별교대조조하강료(46.36±3.82)％화(41.92±3.58) ％(F=33.14,P＜0.01;F=27.56,P＜0.01).결론 HMGB 1특이성siRNA능고효억제HSC-T6세포효원적합성화분비,인이가능구유예방화치료간섬유화적잠력.
