CAJ | 학술논문

目的:探讨建立简便高效的大鼠海马神经元原代培养的纯化方法.方法:(1)离体培养新生24 h内SD乳鼠海马神经元,每天在倒置相差显微镜下进行神经元的形态学观察;(2) MTT法检测培养不同时间段神经元的活力变化,并绘制生长曲线;(3)纯化培养9d神经元利用免疫荧光染色法检测β-微管蛋白Ⅲ(β-tublinⅢ)的表达率.结果:(1)倒置相差显微镜下观察原代培养的海马神经元,刚分离种植时可见神经细胞为圆形,24h大多数细胞贴壁,3d细胞突起增大、增粗,培养5～7d神经元胞体丰满,突起交织成的网络更密集,培养14 ～ 16 d后,神经元开始退化;(2)生长曲线结果发现海马神经元体外培养经历了4个时期,即生长潜伏期、对数生长期、平台期、生长停滞期;(3)经β-tublinⅢ鉴定海马神经元纯度为(93.0％±2.5％).结论:本实验方法步骤简便,可获得纯度较高的海马神经元,为研究与海马神经元相关的疾病提供了实验基础.
목적:탐토건립간편고효적대서해마신경원원대배양적순화방법.방법:(1)리체배양신생24 h내SD유서해마신경원,매천재도치상차현미경하진행신경원적형태학관찰;(2) MTT법검측배양불동시간단신경원적활력변화,병회제생장곡선;(3)순화배양9d신경원이용면역형광염색법검측β-미관단백Ⅲ(β-tublinⅢ)적표체솔.결과:(1)도치상차현미경하관찰원대배양적해마신경원,강분리충식시가견신경세포위원형,24h대다수세포첩벽,3d세포돌기증대、증조,배양5～7d신경원포체봉만,돌기교직성적망락경밀집,배양14 ～ 16 d후,신경원개시퇴화;(2)생장곡선결과발현해마신경원체외배양경력료4개시기,즉생장잠복기、대수생장기、평태기、생장정체기;(3)경β-tublinⅢ감정해마신경원순도위(93.0％±2.5％).결론:본실험방법보취간편,가획득순도교고적해마신경원,위연구여해마신경원상관적질병제공료실험기출.