CAJ | 학술논문

从山东地区某大型养猪场疑似感染猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)的仔猪肠道粪便中,利用ST细胞(猪睾丸细胞系)分离到1株病毒.通过噬斑克隆纯化、病毒理化特性、间接免疫荧光(IFA)、动物回归和RT-PCR进行鉴定.结果表明,病毒株在ST细胞形成形态均一.直径在2 mm～3 mm左右、外形圆而规则噬斑,耐酸,耐胰酶,对乙醚、氯仿、热比较敏感的RNA病毒;IFA鉴定采用共聚焦显微镜观察可见特异性细胞浆内橙红色荧光;动物回归试验出现典型猪传染性胃肠炎临床症状;RT-PCR扩增获得与预期目的基因片段大小一致的条带.综合分析以上结果,证明所分离到的病毒为TGEV,将其命名为TGEV-SDW1株.参照GenBank中TGEV S基因的核苷酸序列,用RT-PCR成功扩增获得分离株的S基因序列,并与Gen-Bank中公布的13株TGEV毒株的S基因序列进行同源性比较,并绘制系统发育进化树.结果表明,分离株S基因片段长为4 350 bp,与13株TGEV毒株氨基酸同源性很高,在96.0％～99.4％之间;核苷酸同源性与TH-98株最高,可达98.2％,与DAE株同源性最低,为77.7％.核苷酸系统进化树结果显示,分离株与中国KT2亲缘关系较近,处于同一分支,表明TGEV-SDW1株来自我国或我国周边国家的变异株.
종산동지구모대형양저장의사감염저전염성위장염병독(TGEV)적자저장도분편중,이용ST세포(저고환세포계)분리도1주병독.통과서반극륭순화、병독이화특성、간접면역형광(IFA)、동물회귀화RT-PCR진행감정.결과표명,병독주재ST세포형성형태균일.직경재2 mm～3 mm좌우、외형원이규칙서반,내산,내이매,대을미、록방、열비교민감적RNA병독;IFA감정채용공취초현미경관찰가견특이성세포장내등홍색형광;동물회귀시험출현전형저전염성위장염림상증상;RT-PCR확증획득여예기목적기인편단대소일치적조대.종합분석이상결과,증명소분리도적병독위TGEV,장기명명위TGEV-SDW1주.삼조GenBank중TGEV S기인적핵감산서렬,용RT-PCR성공확증획득분리주적S기인서렬,병여Gen-Bank중공포적13주TGEV독주적S기인서렬진행동원성비교,병회제계통발육진화수.결과표명,분리주S기인편단장위4 350 bp,여13주TGEV독주안기산동원성흔고,재96.0％～99.4％지간;핵감산동원성여TH-98주최고,가체98.2％,여DAE주동원성최저,위77.7％.핵감산계통진화수결과현시,분리주여중국KT2친연관계교근,처우동일분지,표명TGEV-SDW1주래자아국혹아국주변국가적변이주.