安徽农业科学
安徽農業科學
안휘농업과학
JOURNAL OF ANHUI AGRICULTURAL SCIENCES
2015年
22期
83-86
,共4页
裴丽丽%侯欢欢%卢佳%闫伟莉%任文华
裴麗麗%侯歡歡%盧佳%閆偉莉%任文華
배려려%후환환%로가%염위리%임문화
TRAIL%蝙蝠%荧光实时定量PCR%细胞凋亡
TRAIL%蝙蝠%熒光實時定量PCR%細胞凋亡
TRAIL%편복%형광실시정량PCR%세포조망
TRAIL%Pipistrellus javanicus%Real-time PCR%Apoptosis
[目的]克隆蝙蝠TRAIL基因,构建蝙蝠可溶性TRAIL原核表达栽体,研究其对肿瘤细胞凋亡的影响.[方法]通过RT-PCR技术克隆蝙蝠TRAIL的全长cDNA序列,实时荧光定量PCR鉴定其组织分布,将其可溶性片段与表达载体pET43.1a连接,并在大肠杆菌BL21中高效表达和纯化,通过western blotting证实.体外,通过MTT、TrypanBlue和流式细胞术检测纯化的可溶性TRAIL蛋白能否诱导肿瘤细胞的凋亡.[结果]成功克隆蝙蝠TRAIL基因,构建了重组表达载体,获得可溶性TRAIL蛋白.体外试验证明,可溶性蝙蝠TRAIL蛋白能够诱导Jurkat细胞和HeLa细胞的凋亡.[结论]可溶性蝙蝠TRAIL蛋白可诱导肿瘤细胞凋亡,该研究为蝙蝠免疫系统的研究奠定了基础.
[目的]剋隆蝙蝠TRAIL基因,構建蝙蝠可溶性TRAIL原覈錶達栽體,研究其對腫瘤細胞凋亡的影響.[方法]通過RT-PCR技術剋隆蝙蝠TRAIL的全長cDNA序列,實時熒光定量PCR鑒定其組織分佈,將其可溶性片段與錶達載體pET43.1a連接,併在大腸桿菌BL21中高效錶達和純化,通過western blotting證實.體外,通過MTT、TrypanBlue和流式細胞術檢測純化的可溶性TRAIL蛋白能否誘導腫瘤細胞的凋亡.[結果]成功剋隆蝙蝠TRAIL基因,構建瞭重組錶達載體,穫得可溶性TRAIL蛋白.體外試驗證明,可溶性蝙蝠TRAIL蛋白能夠誘導Jurkat細胞和HeLa細胞的凋亡.[結論]可溶性蝙蝠TRAIL蛋白可誘導腫瘤細胞凋亡,該研究為蝙蝠免疫繫統的研究奠定瞭基礎.
[목적]극륭편복TRAIL기인,구건편복가용성TRAIL원핵표체재체,연구기대종류세포조망적영향.[방법]통과RT-PCR기술극륭편복TRAIL적전장cDNA서렬,실시형광정량PCR감정기조직분포,장기가용성편단여표체재체pET43.1a련접,병재대장간균BL21중고효표체화순화,통과western blotting증실.체외,통과MTT、TrypanBlue화류식세포술검측순화적가용성TRAIL단백능부유도종류세포적조망.[결과]성공극륭편복TRAIL기인,구건료중조표체재체,획득가용성TRAIL단백.체외시험증명,가용성편복TRAIL단백능구유도Jurkat세포화HeLa세포적조망.[결론]가용성편복TRAIL단백가유도종류세포조망,해연구위편복면역계통적연구전정료기출.
