中国药理学通报
中國藥理學通報
중국약이학통보
CHINESE PHARMACOLOGICAL BULLETIN
2015年
8期
1112-1116
,共5页
异补骨脂素%胆汁酸%细胞毒性%胆汁酸合成%胆汁酸转运%HepG2细胞%MRP2%MRP3
異補骨脂素%膽汁痠%細胞毒性%膽汁痠閤成%膽汁痠轉運%HepG2細胞%MRP2%MRP3
이보골지소%담즙산%세포독성%담즙산합성%담즙산전운%HepG2세포%MRP2%MRP3
isopsoralen%bile acid%cytotoxicity%bile acid synthesis%bile acid transport%HepG2 cell%MRP2%MRP3
目的:观察异补骨脂素体外对HepG2细胞毒性和细胞内胆汁酸浓度的影响,并考察其对胆汁酸合成转运的影响。方法不同浓度异补骨脂素在HepG2细胞作用24 h, MTT法检测细胞存活,并检查细胞内胆汁酸浓度。常规TRIzol法提取RNA,real time PCR检测细胞中转运体BSEP、MRP2、 MRP3、 OATP2、 NTCP、 OSTα,合成酶 CYP7A1、CYP27A1和受体 FXR、PXR 的 mRNA 转录水平。结果HepG2细胞存活率随着异补骨脂素浓度升高而剂量依赖性的降低,异补骨脂素作用24 h的IC50为118.1μmol·L-1。100、400μmol·L-1异补骨脂素可使细胞内胆汁酸浓度明显升高。异补骨脂素在25μmol·L-1时就可使MRP2、MRP3、CYP7A1明显降低,当浓度增大到100μmol · L-1时, OATP2、OSTα、CYP27A1、FXR、PXR 也明显升高,但 BSEP、NTCP差异无显著性。结论异补骨脂素可引起HepG2细胞内胆汁酸升高和细胞毒性,其机制可能与抑制 MRP2、MRP3有关。
目的:觀察異補骨脂素體外對HepG2細胞毒性和細胞內膽汁痠濃度的影響,併攷察其對膽汁痠閤成轉運的影響。方法不同濃度異補骨脂素在HepG2細胞作用24 h, MTT法檢測細胞存活,併檢查細胞內膽汁痠濃度。常規TRIzol法提取RNA,real time PCR檢測細胞中轉運體BSEP、MRP2、 MRP3、 OATP2、 NTCP、 OSTα,閤成酶 CYP7A1、CYP27A1和受體 FXR、PXR 的 mRNA 轉錄水平。結果HepG2細胞存活率隨著異補骨脂素濃度升高而劑量依賴性的降低,異補骨脂素作用24 h的IC50為118.1μmol·L-1。100、400μmol·L-1異補骨脂素可使細胞內膽汁痠濃度明顯升高。異補骨脂素在25μmol·L-1時就可使MRP2、MRP3、CYP7A1明顯降低,噹濃度增大到100μmol · L-1時, OATP2、OSTα、CYP27A1、FXR、PXR 也明顯升高,但 BSEP、NTCP差異無顯著性。結論異補骨脂素可引起HepG2細胞內膽汁痠升高和細胞毒性,其機製可能與抑製 MRP2、MRP3有關。
목적:관찰이보골지소체외대HepG2세포독성화세포내담즙산농도적영향,병고찰기대담즙산합성전운적영향。방법불동농도이보골지소재HepG2세포작용24 h, MTT법검측세포존활,병검사세포내담즙산농도。상규TRIzol법제취RNA,real time PCR검측세포중전운체BSEP、MRP2、 MRP3、 OATP2、 NTCP、 OSTα,합성매 CYP7A1、CYP27A1화수체 FXR、PXR 적 mRNA 전록수평。결과HepG2세포존활솔수착이보골지소농도승고이제량의뢰성적강저,이보골지소작용24 h적IC50위118.1μmol·L-1。100、400μmol·L-1이보골지소가사세포내담즙산농도명현승고。이보골지소재25μmol·L-1시취가사MRP2、MRP3、CYP7A1명현강저,당농도증대도100μmol · L-1시, OATP2、OSTα、CYP27A1、FXR、PXR 야명현승고,단 BSEP、NTCP차이무현저성。결론이보골지소가인기HepG2세포내담즙산승고화세포독성,기궤제가능여억제 MRP2、MRP3유관。
Aim To investigate the toxicity of isopsor-alen in HepG2 cells and its effects on bile acid, bile acid synthesis and transport. Methods Cell viability was evaluated by MTT assay and bile acid was deter-mined inside HepG2 cells, with exposure to various isopsoralen for 24h. The mRNA transcription of BSEP, MRP2, MRP3, NTCP, OATP2, OSTα, CYP7A1, CYP27 A1 , FXR and PXR were assessed by real-time PCR. Results The cell viability was decreased dose-dependently with isopsoralen in HepG2 cells, and IC50 was 118. 1μmol·L-1 exposure to isopsoralen for 24h. Bile acid inside cells significantly increased with 100 and 400 μmol · L-1 isopsoralen. Isopsoralen caused the down-regulation of MRP2 , MRP3 , CYP7 A1 mRNA at 25 μmol · L-1 . Beside these, the up-regulation of OATP2,OSTα,CYP27A1,FXR,PXR with 100 μmol· L-1 isopsoralen, but there was no significant change of BSEP and NTCP. Conclusion The results show that isopsoralen induces bile acid accumulation and cytotox-icity which may be associated with the down-regulation of MRP2, MRP3 in HepG2 cells.