河南农业科学
河南農業科學
하남농업과학
JOURNAL OF HENAN AGRICULTURAL SCIENCES
2015年
8期
92-97
,共6页
留兰香%甲基化%土霉素%基因组DNA
留蘭香%甲基化%土黴素%基因組DNA
류란향%갑기화%토매소%기인조DNA
Menthae spicatae L.%methylation%oxytetracycline%genomic DNA
以留兰香为材料,研究了土霉素处理对留兰香生长发育和生理生化反应的影响,以及不同浓度土霉素处理对留兰香基因组DNA的甲基化水平和模式的影响。在无菌条件下,将留兰香茎段接种到含5种不同浓度0(对照)、5、10、15、20μmol/L的土霉素处理培养基上,连续处理14 d。基因组DNA用混合取样法,取100株组培苗嫩叶,混合并提取。用AFLP、MSAP的方法进行相关的分析。结果表明,土霉素处理14 d后,叶绿素含量随着土霉素浓度的升高逐渐降低,丙二醛( MDA)的合成也呈下降趋势。 AFLP分析表明,土霉素处理组与对照组之间未发现特异性片段。 MSAP分析表明,5、10、15、20μmol/L 土霉素处理后,留兰香全基因组 DNA 甲基化水平分别为14.16%、13.92%、18.84%、8.95%,均低于对照(22.75%)；与对照相比,土霉素处理后DNA甲基化率分别为10.31%、10.87%、10.94%、11.34%,去甲基化率分别为11.86%、11.41%、15.63%、17.53%。土霉素影响了留兰香的生长发育,并引起各项生理生化指标的改变。土霉素未造成留兰香基因序列的变异,却能引起基因组DNA甲基化水平降低。
以留蘭香為材料,研究瞭土黴素處理對留蘭香生長髮育和生理生化反應的影響,以及不同濃度土黴素處理對留蘭香基因組DNA的甲基化水平和模式的影響。在無菌條件下,將留蘭香莖段接種到含5種不同濃度0(對照)、5、10、15、20μmol/L的土黴素處理培養基上,連續處理14 d。基因組DNA用混閤取樣法,取100株組培苗嫩葉,混閤併提取。用AFLP、MSAP的方法進行相關的分析。結果錶明,土黴素處理14 d後,葉綠素含量隨著土黴素濃度的升高逐漸降低,丙二醛( MDA)的閤成也呈下降趨勢。 AFLP分析錶明,土黴素處理組與對照組之間未髮現特異性片段。 MSAP分析錶明,5、10、15、20μmol/L 土黴素處理後,留蘭香全基因組 DNA 甲基化水平分彆為14.16%、13.92%、18.84%、8.95%,均低于對照(22.75%)；與對照相比,土黴素處理後DNA甲基化率分彆為10.31%、10.87%、10.94%、11.34%,去甲基化率分彆為11.86%、11.41%、15.63%、17.53%。土黴素影響瞭留蘭香的生長髮育,併引起各項生理生化指標的改變。土黴素未造成留蘭香基因序列的變異,卻能引起基因組DNA甲基化水平降低。
이류란향위재료,연구료토매소처리대류란향생장발육화생리생화반응적영향,이급불동농도토매소처리대류란향기인조DNA적갑기화수평화모식적영향。재무균조건하,장류란향경단접충도함5충불동농도0(대조)、5、10、15、20μmol/L적토매소처리배양기상,련속처리14 d。기인조DNA용혼합취양법,취100주조배묘눈협,혼합병제취。용AFLP、MSAP적방법진행상관적분석。결과표명,토매소처리14 d후,협록소함량수착토매소농도적승고축점강저,병이철( MDA)적합성야정하강추세。 AFLP분석표명,토매소처리조여대조조지간미발현특이성편단。 MSAP분석표명,5、10、15、20μmol/L 토매소처리후,류란향전기인조 DNA 갑기화수평분별위14.16%、13.92%、18.84%、8.95%,균저우대조(22.75%)；여대조상비,토매소처리후DNA갑기화솔분별위10.31%、10.87%、10.94%、11.34%,거갑기화솔분별위11.86%、11.41%、15.63%、17.53%。토매소영향료류란향적생장발육,병인기각항생리생화지표적개변。토매소미조성류란향기인서렬적변이,각능인기기인조DNA갑기화수평강저。
The objectives of this research were to assess the effect of oxytetracycline treatment on the de-velopment as well as genomic DNA methylation levels and patterns of Menthae spicatae L.. Spearmint stems were cultured on MS medium supplied with oxytetracycline(0,5,10,15,20 μmol/L,respectively) for 14 d. Genomic DNA was extracted from leaves. The amplified fragment length polymorphisms( AFLP) and methylation sensitive amplification polymorphism( MSAP) were used to test the genetic and epigene-tic stability. When Menthae spicatae L. were treated by oxytetracycline for 14 d, the chlorophyll content were significantly reduced,whereas the MDA content increased as the concentration of oxytetracycline in-creased. AFLP technique did not detect any sequence change. MSAP technique showed that the genomic DNA methylation levels of Menthae spicatae L. were 14. 16%,13. 92%,18. 84%,8. 95% under 5,10, 15,20 μmol/L oxytetracycline stress,which were lower than that of the untreated plants with 22. 75%;the ratio of methylation and demethylation of Menthae spicatae L. genomic DNA at oxytetracycline concen-trations of 5 ,10 ,15 ,20 μmol/L were 10 . 31%,10. 87%,10. 94%,11. 34% and 11. 86%,11. 41%,15. 63%, 17. 53%. The growth and physiological and biochemical reactionis of Menthae spicatae L. had changed un-der oxytetracycline treatment. Oxytetracycline could not impact the genomic DNA sequence, however, it could result in the reduction of DNA methylation.
