基础医学与临床
基礎醫學與臨床
기출의학여림상
BASIC MEDICAL SCIENCES AND CLINICS
2015年
8期
1072-1077
,共6页
隆霜%谢莹珊%陈黎%姜蓉%王亚平%沈宜
隆霜%謝瑩珊%陳黎%薑蓉%王亞平%瀋宜
륭상%사형산%진려%강용%왕아평%침의
Exosomes%乳腺癌%肿瘤血管生成
Exosomes%乳腺癌%腫瘤血管生成
Exosomes%유선암%종류혈관생성
exosomes%breast cancer%tumor angiogenesis
目的 观察乳腺癌细胞源Exosomes对脐静脉内皮细胞(HUVECs)的生物学效应,初步探讨肿瘤细胞源Exosomes在恶性肿瘤血管病理新生中的作用.方法 收集乳腺癌MDA-MB-231细胞培养上清液,以超速及密度梯度离心提取Exosomes;MTT法检测细胞增殖;用流式细胞仪测定细胞周期;Transwell小室法检测迁移能力;基质胶成管实验观察成管结构的形成;PCR检测EGFR及VEGF mRNA表达;用ELISA及Western blot检测细胞EGFR及其下游ERK、Akt及VEGF/VEGFR2表达.结果 乳腺癌MDA-MB-231细胞源Exosomes以时间-剂量依赖性促进HUVECs细胞增殖(P＜0.05).并且,在作用24h后,S期细胞比例增加,G1/S期细胞比例下降(P＜0.05);同时,HUVEC迁移及体外管腔形成能力显著提高(P＜0.05).并且MDA-MB-231源Exosomes促进了HUVECs细胞EGFR蛋白的表达,使得磷酸化ERK与Akt蛋白的表达增加,同时促进了VEGF蛋白的分泌,并促进了VEGF/VEG-FR2蛋白表达(P＜0.05).结论 乳腺癌细胞源Exosomes促进HUVECs的增殖、迁移及体外成管能力,其机制可能与EGFR蛋白与其下游MAPK/ERK和PI3K/Akt信号通路的持续活化,以及VEGF/VEGFR2蛋白的表达有关.
目的 觀察乳腺癌細胞源Exosomes對臍靜脈內皮細胞(HUVECs)的生物學效應,初步探討腫瘤細胞源Exosomes在噁性腫瘤血管病理新生中的作用.方法 收集乳腺癌MDA-MB-231細胞培養上清液,以超速及密度梯度離心提取Exosomes;MTT法檢測細胞增殖;用流式細胞儀測定細胞週期;Transwell小室法檢測遷移能力;基質膠成管實驗觀察成管結構的形成;PCR檢測EGFR及VEGF mRNA錶達;用ELISA及Western blot檢測細胞EGFR及其下遊ERK、Akt及VEGF/VEGFR2錶達.結果 乳腺癌MDA-MB-231細胞源Exosomes以時間-劑量依賴性促進HUVECs細胞增殖(P＜0.05).併且,在作用24h後,S期細胞比例增加,G1/S期細胞比例下降(P＜0.05);同時,HUVEC遷移及體外管腔形成能力顯著提高(P＜0.05).併且MDA-MB-231源Exosomes促進瞭HUVECs細胞EGFR蛋白的錶達,使得燐痠化ERK與Akt蛋白的錶達增加,同時促進瞭VEGF蛋白的分泌,併促進瞭VEGF/VEG-FR2蛋白錶達(P＜0.05).結論 乳腺癌細胞源Exosomes促進HUVECs的增殖、遷移及體外成管能力,其機製可能與EGFR蛋白與其下遊MAPK/ERK和PI3K/Akt信號通路的持續活化,以及VEGF/VEGFR2蛋白的錶達有關.
목적 관찰유선암세포원Exosomes대제정맥내피세포(HUVECs)적생물학효응,초보탐토종류세포원Exosomes재악성종류혈관병리신생중적작용.방법 수집유선암MDA-MB-231세포배양상청액,이초속급밀도제도리심제취Exosomes;MTT법검측세포증식;용류식세포의측정세포주기;Transwell소실법검측천이능력;기질효성관실험관찰성관결구적형성;PCR검측EGFR급VEGF mRNA표체;용ELISA급Western blot검측세포EGFR급기하유ERK、Akt급VEGF/VEGFR2표체.결과 유선암MDA-MB-231세포원Exosomes이시간-제량의뢰성촉진HUVECs세포증식(P＜0.05).병차,재작용24h후,S기세포비례증가,G1/S기세포비례하강(P＜0.05);동시,HUVEC천이급체외관강형성능력현저제고(P＜0.05).병차MDA-MB-231원Exosomes촉진료HUVECs세포EGFR단백적표체,사득린산화ERK여Akt단백적표체증가,동시촉진료VEGF단백적분비,병촉진료VEGF/VEG-FR2단백표체(P＜0.05).결론 유선암세포원Exosomes촉진HUVECs적증식、천이급체외성관능력,기궤제가능여EGFR단백여기하유MAPK/ERK화PI3K/Akt신호통로적지속활화,이급VEGF/VEGFR2단백적표체유관.
