基础医学与临床
基礎醫學與臨床
기출의학여림상
BASIC MEDICAL SCIENCES AND CLINICS
2015年
8期
1025-1030
,共6页
方红娟%冯琼%王强%张强%史云湘%陈金龙%钟历勇
方紅娟%馮瓊%王彊%張彊%史雲湘%陳金龍%鐘歷勇
방홍연%풍경%왕강%장강%사운상%진금룡%종력용
1-磷酸鞘氨醇%LO2细胞%胰岛素抵抗%糖代谢
1-燐痠鞘氨醇%LO2細胞%胰島素牴抗%糖代謝
1-린산초안순%LO2세포%이도소저항%당대사
sphingosine 1-phosphate%LO2 cell%insulin resistance%glucose metabolism
目的 观察鞘氨醇激酶1(SPK1)催化产物1-磷酸鞘氨醇(S1P)对LO2肝细胞胰岛素抵抗模型糖代谢的影响.方法 用胰岛素诱导人正常肝细胞(LO2)产生胰岛素抵抗,MTT法检测LO2细胞增殖,葡萄糖-己糖激酶法检测培养基残存葡萄糖浓度,油红O鉴定LO2细胞脂肪变性,荧光双染法鉴定线粒体ROS,Western blot检测SPK1蛋白表达.结果 与对照组相比,10、100和1 000 nmol/L 3个浓度的胰岛素对细胞葡萄糖摄取能力无显著影响;1 000 nmol/L浓度的胰岛素作用细胞48 h时胰岛素敏感指数下降,胰岛素抵抗模型建立.与对照组相比,模型组细胞脂滴面积增加(P＜0.05),SPK1表达量呈增加趋势,线粒体ROS也显著增加.在模型组中加入S1P后,可显著促进细胞对葡萄糖的吸收(P＜0.05).结论 成功构建胰岛素诱导的LO2肝细胞胰岛素抵抗模型,并且发现S1P可以促进模型细胞糖代谢,提示S1P可作为筛选降糖药物的新靶点.
目的 觀察鞘氨醇激酶1(SPK1)催化產物1-燐痠鞘氨醇(S1P)對LO2肝細胞胰島素牴抗模型糖代謝的影響.方法 用胰島素誘導人正常肝細胞(LO2)產生胰島素牴抗,MTT法檢測LO2細胞增殖,葡萄糖-己糖激酶法檢測培養基殘存葡萄糖濃度,油紅O鑒定LO2細胞脂肪變性,熒光雙染法鑒定線粒體ROS,Western blot檢測SPK1蛋白錶達.結果 與對照組相比,10、100和1 000 nmol/L 3箇濃度的胰島素對細胞葡萄糖攝取能力無顯著影響;1 000 nmol/L濃度的胰島素作用細胞48 h時胰島素敏感指數下降,胰島素牴抗模型建立.與對照組相比,模型組細胞脂滴麵積增加(P＜0.05),SPK1錶達量呈增加趨勢,線粒體ROS也顯著增加.在模型組中加入S1P後,可顯著促進細胞對葡萄糖的吸收(P＜0.05).結論 成功構建胰島素誘導的LO2肝細胞胰島素牴抗模型,併且髮現S1P可以促進模型細胞糖代謝,提示S1P可作為篩選降糖藥物的新靶點.
목적 관찰초안순격매1(SPK1)최화산물1-린산초안순(S1P)대LO2간세포이도소저항모형당대사적영향.방법 용이도소유도인정상간세포(LO2)산생이도소저항,MTT법검측LO2세포증식,포도당-기당격매법검측배양기잔존포도당농도,유홍O감정LO2세포지방변성,형광쌍염법감정선립체ROS,Western blot검측SPK1단백표체.결과 여대조조상비,10、100화1 000 nmol/L 3개농도적이도소대세포포도당섭취능력무현저영향;1 000 nmol/L농도적이도소작용세포48 h시이도소민감지수하강,이도소저항모형건립.여대조조상비,모형조세포지적면적증가(P＜0.05),SPK1표체량정증가추세,선립체ROS야현저증가.재모형조중가입S1P후,가현저촉진세포대포도당적흡수(P＜0.05).결론 성공구건이도소유도적LO2간세포이도소저항모형,병차발현S1P가이촉진모형세포당대사,제시S1P가작위사선강당약물적신파점.
