禽伤寒沙门氏菌SG9R株asd基因缺失株平衡致死系统平台的构建
금상한사문씨균SG9R주asd기인결실주평형치사계통평태적구건
Construction of chromosome-plasmid balance lethal system based on Salmonella Gallinarum 9R asd deletion mutant
  • 万方数据
    中国预防兽医学报 중국예방수의학보
    CHINESE JOURNAL OF PREVENTIVE VETERINARY MEDICINE
    2015年 8期 595-599 ,共5页

    王小舟%杨样%胡会杰%宋玉洁%王勇祥%谢静%李芙蓉%陆广富%朱国强

    왕소주%양양%호회걸%송옥길%왕용상%사정%리부용%륙엄부%주국강

    禽伤寒沙门氏菌%asd基因%平衡致死系统%绿色荧光蛋白 禽傷寒沙門氏菌%asd基因%平衡緻死繫統%綠色熒光蛋白
    금상한사문씨균%asd기인%평형치사계통%록색형광단백
    Salmonella Gallinarum%asd gene%balanced lethal system%GFP expression
    为研发以禽伤寒沙门氏菌(SG) SG9R弱毒疫苗株为载体表达外源基因的活菌疫苗,本研究利用Red同源重组系统对SG9R株基因组中编码天冬氨酸β-半醛脱氢酶的asd基因进行敲除,构建SG9R△asd缺失突变株.该突变株在缺乏外源DAP培养条件下溶菌死亡,而在添加DAP或导入表达链球菌asd+质粒pYA3342后才能够恢复增殖能力,以此建立了以asd营养基因为筛选标志的SG染色体-质粒平衡致死系统.并且进一步采用绿色荧光蛋白(GFP)基因作为报告基因,将其克隆于asd+质粒pYA3342中,电转化于SG9R△asd缺失突变株中,通过无DAP培养条件的筛选,获得了表达GFP外源基因的SG重组菌,经体外连续25次传代后,鉴定结果显示,GFP仍能够在重组SG中持续稳定的表达.本研究结果为以SG弱毒疫苗菌株作为活载体的基因工程疫苗的研制提供简便易行的操作平台.
    위연발이금상한사문씨균(SG) SG9R약독역묘주위재체표체외원기인적활균역묘,본연구이용Red동원중조계통대SG9R주기인조중편마천동안산β-반철탈경매적asd기인진행고제,구건SG9R△asd결실돌변주.해돌변주재결핍외원DAP배양조건하용균사망,이재첨가DAP혹도입표체련구균asd+질립pYA3342후재능구회복증식능력,이차건립료이asd영양기인위사선표지적SG염색체-질립평형치사계통.병차진일보채용록색형광단백(GFP)기인작위보고기인,장기극륭우asd+질립pYA3342중,전전화우SG9R△asd결실돌변주중,통과무DAP배양조건적사선,획득료표체GFP외원기인적SG중조균,경체외련속25차전대후,감정결과현시,GFP잉능구재중조SG중지속은정적표체.본연구결과위이SG약독역묘균주작위활재체적기인공정역묘적연제제공간편역행적조작평태.
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