中国预防兽医学报
中國預防獸醫學報
중국예방수의학보
CHINESE JOURNAL OF PREVENTIVE VETERINARY MEDICINE
2015年
8期
628-631
,共4页
梁君妮%尹伟力%刘宁%许红岩
樑君妮%尹偉力%劉寧%許紅巖
량군니%윤위력%류저%허홍암
鳗弧菌%检测%赖解旋酶DNA恒温扩增技术
鰻弧菌%檢測%賴解鏇酶DNA恆溫擴增技術
만호균%검측%뢰해선매DNA항온확증기술
Vibrio anguillarum%detection%helicase-dependent isothermal DNA amplification
为建立一种鱼类鳗弧菌的快速检测方法,本研究以鳗弧菌的toxR基因为靶基因设计特异性引物,并对反应条件和反应体系进行优化,建立了基于赖解旋酶DNA恒温扩增技术(HDA)的鳗弧菌快速检测方法.结果显示,该方法对鱼类鳗弧菌检测为阳性,而对其他鱼类病原菌的检测结果均为阴性,具有良好的特异性;标准菌株菌体基因组DNA最低检测限为30 ng/mL,人工污染模拟样品的最低检出限为2.1×102 cfu/mL;利用该方法与普通PCR方法对临床120份鱼类样品进行检测,符合率为100%,检出率均高于细菌培养法.本研究建立的检测鳗弧菌的HDA法具有快速、简便、特异、灵敏等特点,适合基层实验室使用,具有广泛的应用前景.
為建立一種魚類鰻弧菌的快速檢測方法,本研究以鰻弧菌的toxR基因為靶基因設計特異性引物,併對反應條件和反應體繫進行優化,建立瞭基于賴解鏇酶DNA恆溫擴增技術(HDA)的鰻弧菌快速檢測方法.結果顯示,該方法對魚類鰻弧菌檢測為暘性,而對其他魚類病原菌的檢測結果均為陰性,具有良好的特異性;標準菌株菌體基因組DNA最低檢測限為30 ng/mL,人工汙染模擬樣品的最低檢齣限為2.1×102 cfu/mL;利用該方法與普通PCR方法對臨床120份魚類樣品進行檢測,符閤率為100%,檢齣率均高于細菌培養法.本研究建立的檢測鰻弧菌的HDA法具有快速、簡便、特異、靈敏等特點,適閤基層實驗室使用,具有廣汎的應用前景.
위건립일충어류만호균적쾌속검측방법,본연구이만호균적toxR기인위파기인설계특이성인물,병대반응조건화반응체계진행우화,건립료기우뢰해선매DNA항온확증기술(HDA)적만호균쾌속검측방법.결과현시,해방법대어류만호균검측위양성,이대기타어류병원균적검측결과균위음성,구유량호적특이성;표준균주균체기인조DNA최저검측한위30 ng/mL,인공오염모의양품적최저검출한위2.1×102 cfu/mL;이용해방법여보통PCR방법대림상120빈어류양품진행검측,부합솔위100%,검출솔균고우세균배양법.본연구건립적검측만호균적HDA법구유쾌속、간편、특이、령민등특점,괄합기층실험실사용,구유엄범적응용전경.