中国预防兽医学报
中國預防獸醫學報
중국예방수의학보
CHINESE JOURNAL OF PREVENTIVE VETERINARY MEDICINE
2015年
8期
585-589
,共5页
杨洁%温志远%葛金英%王金良%华荣虹%邵钰%步志高
楊潔%溫誌遠%葛金英%王金良%華榮虹%邵鈺%步誌高
양길%온지원%갈금영%왕금량%화영홍%소옥%보지고
西尼罗病毒%PrM/E蛋白%重组新城疫病毒
西尼囉病毒%PrM/E蛋白%重組新城疫病毒
서니라병독%PrM/E단백%중조신성역병독
West Nile virus%PrM/E proteins%recombinant Newcastle disease virus
西尼罗病毒(WNV)是一种可以导致人与动物死亡的人兽共患病的虫媒病毒.为构建表达WNVPrM/E蛋白的重组新城疫病毒(NDV) LaSota疫苗株并对其免疫原性进行评价,本研究利用反向遗传学操作技术将人工合成的WNV prM/E基因插入至NDV基因组P和M基因之间,构建重组病毒rLa-WNV-PrM/E.以重组病毒分别感染BHK-21细胞和免疫小鼠,利用RT-PCR、间接免疫荧光、ELISA和流式细胞术(FACS)检测PrM/E蛋白的表达情况及免疫效果.结果显示,WNV-PrM/E蛋白在BHK-21细胞中获得正确表达,免疫小鼠可以诱导其产生高水平的抗PrM/E蛋白特异性IgG,并且诱导产生WNVE蛋白表位特异性CD4+和CD8+T细胞免疫反应.以上结果表明本研究构建的rLa-WNV-PrM/E可以作为一种具有前瞻性和储备性且安全有效的西尼罗热防控候选疫苗,对我国应对该病的潜在威胁具有十分重要的意义.
西尼囉病毒(WNV)是一種可以導緻人與動物死亡的人獸共患病的蟲媒病毒.為構建錶達WNVPrM/E蛋白的重組新城疫病毒(NDV) LaSota疫苗株併對其免疫原性進行評價,本研究利用反嚮遺傳學操作技術將人工閤成的WNV prM/E基因插入至NDV基因組P和M基因之間,構建重組病毒rLa-WNV-PrM/E.以重組病毒分彆感染BHK-21細胞和免疫小鼠,利用RT-PCR、間接免疫熒光、ELISA和流式細胞術(FACS)檢測PrM/E蛋白的錶達情況及免疫效果.結果顯示,WNV-PrM/E蛋白在BHK-21細胞中穫得正確錶達,免疫小鼠可以誘導其產生高水平的抗PrM/E蛋白特異性IgG,併且誘導產生WNVE蛋白錶位特異性CD4+和CD8+T細胞免疫反應.以上結果錶明本研究構建的rLa-WNV-PrM/E可以作為一種具有前瞻性和儲備性且安全有效的西尼囉熱防控候選疫苗,對我國應對該病的潛在威脅具有十分重要的意義.
서니라병독(WNV)시일충가이도치인여동물사망적인수공환병적충매병독.위구건표체WNVPrM/E단백적중조신성역병독(NDV) LaSota역묘주병대기면역원성진행평개,본연구이용반향유전학조작기술장인공합성적WNV prM/E기인삽입지NDV기인조P화M기인지간,구건중조병독rLa-WNV-PrM/E.이중조병독분별감염BHK-21세포화면역소서,이용RT-PCR、간접면역형광、ELISA화류식세포술(FACS)검측PrM/E단백적표체정황급면역효과.결과현시,WNV-PrM/E단백재BHK-21세포중획득정학표체,면역소서가이유도기산생고수평적항PrM/E단백특이성IgG,병차유도산생WNVE단백표위특이성CD4+화CD8+T세포면역반응.이상결과표명본연구구건적rLa-WNV-PrM/E가이작위일충구유전첨성화저비성차안전유효적서니라열방공후선역묘,대아국응대해병적잠재위협구유십분중요적의의.
