中国预防兽医学报
中國預防獸醫學報
중국예방수의학보
CHINESE JOURNAL OF PREVENTIVE VETERINARY MEDICINE
2015年
8期
571-575
,共5页
于桂梅%周微微%祖述龙%王子龙%陈曦%葛金英%步志高
于桂梅%週微微%祖述龍%王子龍%陳晞%葛金英%步誌高
우계매%주미미%조술룡%왕자룡%진희%갈금영%보지고
狂犬病病毒%G蛋白%新城疫病毒%F蛋白%跨膜区%膜内区
狂犬病病毒%G蛋白%新城疫病毒%F蛋白%跨膜區%膜內區
광견병병독%G단백%신성역병독%F단백%과막구%막내구
rabies virus%G protein%Newcastle disease virus%F protein%transmembrane domain%cytoplasmic tail
为研究表达狂犬病病毒(RV)糖蛋白(G)重组新城疫病毒(rL-RVG)中RV G跨膜区(TM)及膜内区(CT)对RVG蛋白表达、病毒蚀斑的形成以及免疫原性的影响,本研究采用新城疫病毒(NDV)融合蛋白(F)的TM和CT替换G蛋白的相应部分,构建出表达RV嵌合G蛋白(RVGTC)的重组NDV (rL-RVGTC).激光共聚焦和western blot检测结果显示,rL-RVG和rL-RVGTC在BHK-21细胞中RVG表达量无显著差异;而且rL-RVG与rL-RVGTC在鸡胚中的病毒增殖滴度也无显著差异.但间接免疫荧光结果表明,rL-RVGTC在BHK-21细胞中丧失RV或rL-RVG形成病毒蚀斑的能力.并且以5×107半数鸡胚感染量(EID50)的rL-RVG和rL-RVGTC分别免疫小鼠后,rL-RVGTC诱导产生的RV中和抗体的滴度显著低于rL-RVG诱导的滴度.本实验结果显示TM和CT对RV G的病毒蚀斑形成及其免疫原性是必不可少的.
為研究錶達狂犬病病毒(RV)糖蛋白(G)重組新城疫病毒(rL-RVG)中RV G跨膜區(TM)及膜內區(CT)對RVG蛋白錶達、病毒蝕斑的形成以及免疫原性的影響,本研究採用新城疫病毒(NDV)融閤蛋白(F)的TM和CT替換G蛋白的相應部分,構建齣錶達RV嵌閤G蛋白(RVGTC)的重組NDV (rL-RVGTC).激光共聚焦和western blot檢測結果顯示,rL-RVG和rL-RVGTC在BHK-21細胞中RVG錶達量無顯著差異;而且rL-RVG與rL-RVGTC在鷄胚中的病毒增殖滴度也無顯著差異.但間接免疫熒光結果錶明,rL-RVGTC在BHK-21細胞中喪失RV或rL-RVG形成病毒蝕斑的能力.併且以5×107半數鷄胚感染量(EID50)的rL-RVG和rL-RVGTC分彆免疫小鼠後,rL-RVGTC誘導產生的RV中和抗體的滴度顯著低于rL-RVG誘導的滴度.本實驗結果顯示TM和CT對RV G的病毒蝕斑形成及其免疫原性是必不可少的.
위연구표체광견병병독(RV)당단백(G)중조신성역병독(rL-RVG)중RV G과막구(TM)급막내구(CT)대RVG단백표체、병독식반적형성이급면역원성적영향,본연구채용신성역병독(NDV)융합단백(F)적TM화CT체환G단백적상응부분,구건출표체RV감합G단백(RVGTC)적중조NDV (rL-RVGTC).격광공취초화western blot검측결과현시,rL-RVG화rL-RVGTC재BHK-21세포중RVG표체량무현저차이;이차rL-RVG여rL-RVGTC재계배중적병독증식적도야무현저차이.단간접면역형광결과표명,rL-RVGTC재BHK-21세포중상실RV혹rL-RVG형성병독식반적능력.병차이5×107반수계배감염량(EID50)적rL-RVG화rL-RVGTC분별면역소서후,rL-RVGTC유도산생적RV중화항체적적도현저저우rL-RVG유도적적도.본실험결과현시TM화CT대RV G적병독식반형성급기면역원성시필불가소적.
