中国抗生素杂志
中國抗生素雜誌
중국항생소잡지
CHINESE JOURNAL OF ANTIBIOTICS
2015年
8期
575-578
,共4页
地中海拟无枝酸菌%利福霉素%电转化%转化率
地中海擬無枝痠菌%利福黴素%電轉化%轉化率
지중해의무지산균%리복매소%전전화%전화솔
A.mediterranei%Rifamycin%Electroporation%Transformation efficiency
目的 为了获得较高的地中海拟无枝酸菌的转化率,进行了电转化条件的优化.方法 以大肠埃希菌-拟无枝酸菌穿梭质粒pULVK1-Am为载体,地中海拟无枝酸菌为受体菌,考察了收集菌体时期、细胞壁弱化方式、电击缓冲液和电击参数等因素对转化率的影响.结果 以0.1μg/mL氨苄西林处理细胞,A600为0.7～0.8时收集菌体,用溶菌酶-LiAc-DTT溶液于37℃孵育30min,去离子水作电击缓冲液,7.5kV/cm、25μF、750W下进行电击,转化率最高可达到9.23×104CFU/μg质粒DNA.结论 只有将不同机制的3种细胞壁弱化剂组合起来对拟无枝酸菌进行处理时,才能得到较高的转化率.
目的 為瞭穫得較高的地中海擬無枝痠菌的轉化率,進行瞭電轉化條件的優化.方法 以大腸埃希菌-擬無枝痠菌穿梭質粒pULVK1-Am為載體,地中海擬無枝痠菌為受體菌,攷察瞭收集菌體時期、細胞壁弱化方式、電擊緩遲液和電擊參數等因素對轉化率的影響.結果 以0.1μg/mL氨芐西林處理細胞,A600為0.7～0.8時收集菌體,用溶菌酶-LiAc-DTT溶液于37℃孵育30min,去離子水作電擊緩遲液,7.5kV/cm、25μF、750W下進行電擊,轉化率最高可達到9.23×104CFU/μg質粒DNA.結論 隻有將不同機製的3種細胞壁弱化劑組閤起來對擬無枝痠菌進行處理時,纔能得到較高的轉化率.
목적 위료획득교고적지중해의무지산균적전화솔,진행료전전화조건적우화.방법 이대장애희균-의무지산균천사질립pULVK1-Am위재체,지중해의무지산균위수체균,고찰료수집균체시기、세포벽약화방식、전격완충액화전격삼수등인소대전화솔적영향.결과 이0.1μg/mL안변서림처리세포,A600위0.7～0.8시수집균체,용용균매-LiAc-DTT용액우37℃부육30min,거리자수작전격완충액,7.5kV/cm、25μF、750W하진행전격,전화솔최고가체도9.23×104CFU/μg질립DNA.결론 지유장불동궤제적3충세포벽약화제조합기래대의무지산균진행처리시,재능득도교고적전화솔.
