安徽中医药大学学报
安徽中醫藥大學學報
안휘중의약대학학보
JOURNAL OF ANHUI TRADITIONAL CHINESE MEDICAL COLLEGE
2015年
4期
58-64
,共7页
赵雯%马艳红%韩咏竹%程楠%饶娆%王训
趙雯%馬豔紅%韓詠竹%程楠%饒嬈%王訓
조문%마염홍%한영죽%정남%요요%왕훈
肝豆状核变性%肝豆汤改良方%TX小鼠%神经细胞损伤%细胞凋亡
肝豆狀覈變性%肝豆湯改良方%TX小鼠%神經細胞損傷%細胞凋亡
간두상핵변성%간두탕개량방%TX소서%신경세포손상%세포조망
Wilson's disease%modified Gandou Decoction%TX mice%neuronal injury%apoptosis
目的 探究肝豆汤改良方抑制肝豆状核变性(Wilson's disease,WD)脑神经细胞凋亡的分子机制.方法 选取1月龄TX小鼠120只,随机分为TX模型组(40只)、肝豆汤改良方组(40只)、丁苯酞组(20只),另选DL小鼠40只作为正常组;每组再分成2组,各20只,分别予以生理盐水、肝豆汤改良方、丁苯酞灌胃2个月和4个月.分别采用免疫组织化学法和Western blot法检测小鼠脑组织中X-连锁凋亡抑制蛋白(X-linked inhibitor of apoptosis,XIAP)、胱冬肽酶-9(Caspase-9)及胱冬肽酶-3(Caspase-3)蛋白表达水平,采用RT-PCR技术检测小鼠脑组织中XIAP、Caspase-9及Caspase-3 mRNA表达水平.结果 免疫组织化学检测显示,肝豆汤改良方组XIAP表达水平较同月龄模型组明显增多,Caspase-9和Caspase-3表达水平较同月龄模型组下降,5月龄和3月龄肝豆汤改良方组XIAP和Caspase-3表达水平有所差异.Western blot检测结果显示,月龄因素对脑组织XIAP、Caspase-9、Caspase-3蛋白表达水平的主效应均无统计学意义(P＞0.05);月龄因素和分组因素对3种蛋白表达水平的交互作用均无统计学意义(P＞0.05);对于同月龄小鼠,模型组脑组织XIAP表达水平显著低于正常组(P＜0.05),Caspase-9和Caspase-3蛋白表达水平显著高于正常组(P＜0.05);肝豆汤改良方组XIAP表达水平显著高于模型组(P＜0.05),Caspase-9和Caspase-3蛋白表达水平显著低于模型组(P＜0.05).RT-PCR检测结果显示,月龄因素对小鼠脑组织XIAP mRNA表达水平的主效应无统计学意义(P＞0.05),但对Caspase-9、Caspase-3 mRNA表达水平的主效应具有统计学意义(P＜0.05);月龄因素和分组因素对XIAP、Caspase-9、Caspase-3 mRNA表达水平的交互作用均无统计学意义(P＞0.05).对于相同月龄小鼠,模型组脑组织XIAP mRNA表达水平显著低于正常组(P＜0.05),而Caspase-9、Caspase-3 mRNA表达水平显著高于正常组(P＜0.05);与模型组比较,丁苯酞组和肝豆汤改良方组XIAP mRNA表达水平显著升高(P＜0.05),Caspase-9和Caspase-3 mRNA表达水平显著降低(P＜0.05).结论 肝豆汤改良方通过上调XIAP蛋白及其mRNA的表达,下调Caspase-9、Caspase-3蛋白及其mRNA在脑组织中的表达,减轻铜沉积对神经细胞的氧化应激损伤,从而抑制神经细胞的凋亡.
目的 探究肝豆湯改良方抑製肝豆狀覈變性(Wilson's disease,WD)腦神經細胞凋亡的分子機製.方法 選取1月齡TX小鼠120隻,隨機分為TX模型組(40隻)、肝豆湯改良方組(40隻)、丁苯酞組(20隻),另選DL小鼠40隻作為正常組;每組再分成2組,各20隻,分彆予以生理鹽水、肝豆湯改良方、丁苯酞灌胃2箇月和4箇月.分彆採用免疫組織化學法和Western blot法檢測小鼠腦組織中X-連鎖凋亡抑製蛋白(X-linked inhibitor of apoptosis,XIAP)、胱鼕肽酶-9(Caspase-9)及胱鼕肽酶-3(Caspase-3)蛋白錶達水平,採用RT-PCR技術檢測小鼠腦組織中XIAP、Caspase-9及Caspase-3 mRNA錶達水平.結果 免疫組織化學檢測顯示,肝豆湯改良方組XIAP錶達水平較同月齡模型組明顯增多,Caspase-9和Caspase-3錶達水平較同月齡模型組下降,5月齡和3月齡肝豆湯改良方組XIAP和Caspase-3錶達水平有所差異.Western blot檢測結果顯示,月齡因素對腦組織XIAP、Caspase-9、Caspase-3蛋白錶達水平的主效應均無統計學意義(P＞0.05);月齡因素和分組因素對3種蛋白錶達水平的交互作用均無統計學意義(P＞0.05);對于同月齡小鼠,模型組腦組織XIAP錶達水平顯著低于正常組(P＜0.05),Caspase-9和Caspase-3蛋白錶達水平顯著高于正常組(P＜0.05);肝豆湯改良方組XIAP錶達水平顯著高于模型組(P＜0.05),Caspase-9和Caspase-3蛋白錶達水平顯著低于模型組(P＜0.05).RT-PCR檢測結果顯示,月齡因素對小鼠腦組織XIAP mRNA錶達水平的主效應無統計學意義(P＞0.05),但對Caspase-9、Caspase-3 mRNA錶達水平的主效應具有統計學意義(P＜0.05);月齡因素和分組因素對XIAP、Caspase-9、Caspase-3 mRNA錶達水平的交互作用均無統計學意義(P＞0.05).對于相同月齡小鼠,模型組腦組織XIAP mRNA錶達水平顯著低于正常組(P＜0.05),而Caspase-9、Caspase-3 mRNA錶達水平顯著高于正常組(P＜0.05);與模型組比較,丁苯酞組和肝豆湯改良方組XIAP mRNA錶達水平顯著升高(P＜0.05),Caspase-9和Caspase-3 mRNA錶達水平顯著降低(P＜0.05).結論 肝豆湯改良方通過上調XIAP蛋白及其mRNA的錶達,下調Caspase-9、Caspase-3蛋白及其mRNA在腦組織中的錶達,減輕銅沉積對神經細胞的氧化應激損傷,從而抑製神經細胞的凋亡.
목적 탐구간두탕개량방억제간두상핵변성(Wilson's disease,WD)뇌신경세포조망적분자궤제.방법 선취1월령TX소서120지,수궤분위TX모형조(40지)、간두탕개량방조(40지)、정분태조(20지),령선DL소서40지작위정상조;매조재분성2조,각20지,분별여이생리염수、간두탕개량방、정분태관위2개월화4개월.분별채용면역조직화학법화Western blot법검측소서뇌조직중X-련쇄조망억제단백(X-linked inhibitor of apoptosis,XIAP)、광동태매-9(Caspase-9)급광동태매-3(Caspase-3)단백표체수평,채용RT-PCR기술검측소서뇌조직중XIAP、Caspase-9급Caspase-3 mRNA표체수평.결과 면역조직화학검측현시,간두탕개량방조XIAP표체수평교동월령모형조명현증다,Caspase-9화Caspase-3표체수평교동월령모형조하강,5월령화3월령간두탕개량방조XIAP화Caspase-3표체수평유소차이.Western blot검측결과현시,월령인소대뇌조직XIAP、Caspase-9、Caspase-3단백표체수평적주효응균무통계학의의(P＞0.05);월령인소화분조인소대3충단백표체수평적교호작용균무통계학의의(P＞0.05);대우동월령소서,모형조뇌조직XIAP표체수평현저저우정상조(P＜0.05),Caspase-9화Caspase-3단백표체수평현저고우정상조(P＜0.05);간두탕개량방조XIAP표체수평현저고우모형조(P＜0.05),Caspase-9화Caspase-3단백표체수평현저저우모형조(P＜0.05).RT-PCR검측결과현시,월령인소대소서뇌조직XIAP mRNA표체수평적주효응무통계학의의(P＞0.05),단대Caspase-9、Caspase-3 mRNA표체수평적주효응구유통계학의의(P＜0.05);월령인소화분조인소대XIAP、Caspase-9、Caspase-3 mRNA표체수평적교호작용균무통계학의의(P＞0.05).대우상동월령소서,모형조뇌조직XIAP mRNA표체수평현저저우정상조(P＜0.05),이Caspase-9、Caspase-3 mRNA표체수평현저고우정상조(P＜0.05);여모형조비교,정분태조화간두탕개량방조XIAP mRNA표체수평현저승고(P＜0.05),Caspase-9화Caspase-3 mRNA표체수평현저강저(P＜0.05).결론 간두탕개량방통과상조XIAP단백급기mRNA적표체,하조Caspase-9、Caspase-3단백급기mRNA재뇌조직중적표체,감경동침적대신경세포적양화응격손상,종이억제신경세포적조망.
