疑难病杂志
疑難病雜誌
의난병잡지
JOURNAL OF DIFFICULT AND COMPLICATED CASES
2015年
3期
280-283
,共4页
杨丽%赵新兰%雷丹丹%廖斌%秦爱平
楊麗%趙新蘭%雷丹丹%廖斌%秦愛平
양려%조신란%뢰단단%료빈%진애평
microRNA%T细胞核因子1蛋白%肿瘤坏死因子受体相关因子-6%破骨细胞分化%转录因子%启动子
microRNA%T細胞覈因子1蛋白%腫瘤壞死因子受體相關因子-6%破骨細胞分化%轉錄因子%啟動子
microRNA%T세포핵인자1단백%종류배사인자수체상관인자-6%파골세포분화%전록인자%계동자
microRNA%T nuclear factor 1 protein%Tumor necrosis factor receptor associated factor 6%Osteoclast differentiation%Transcription factor%Promoter
目的 研究破骨细胞分化中miR-125a受转录因子NFATc1的调控模式及其作用机制,寻找骨代谢疾病新的治疗靶点.方法 单核细胞集落刺激因子(M-CSF)和核因子-κB配体的受体激活剂(RANKL)诱导CD14外周血单核细胞(PBMCs)向破骨细胞分化.生物信息学运算预测结合于miR-125a启动子区域的转录因子,过表达实验和抑制实验用于研究转录因子对miR-125a在破骨细胞分化中表达的影响,荧光素酶报告基因实验验证miR-125a与其靶基因之间的结合,凝胶迁移电泳实验(EMSA)和染色质免疫沉淀实验(CHIP)验证转录因子与miR-125a启动子区域的结合.结果 凝胶迁移电泳和染色质免疫沉淀实验证明了NFATc1结合于miR-125a的启动子靶位点.过表达NFATc1抑制miR-125a的表达;抑制NFATc1的表达则升高miR-125a的表达.结论 miR-125a在作用于其靶基因——肿瘤坏死因子受体相关因子(TRAF)6的同时受到转录因子NFATc1的负反馈调控,发挥其在破骨细胞分化中的调控作用.表明通过调控NFATc1的表达来改变miR-125a的表达,可能成为骨代谢疾病新的治疗靶点.
目的 研究破骨細胞分化中miR-125a受轉錄因子NFATc1的調控模式及其作用機製,尋找骨代謝疾病新的治療靶點.方法 單覈細胞集落刺激因子(M-CSF)和覈因子-κB配體的受體激活劑(RANKL)誘導CD14外週血單覈細胞(PBMCs)嚮破骨細胞分化.生物信息學運算預測結閤于miR-125a啟動子區域的轉錄因子,過錶達實驗和抑製實驗用于研究轉錄因子對miR-125a在破骨細胞分化中錶達的影響,熒光素酶報告基因實驗驗證miR-125a與其靶基因之間的結閤,凝膠遷移電泳實驗(EMSA)和染色質免疫沉澱實驗(CHIP)驗證轉錄因子與miR-125a啟動子區域的結閤.結果 凝膠遷移電泳和染色質免疫沉澱實驗證明瞭NFATc1結閤于miR-125a的啟動子靶位點.過錶達NFATc1抑製miR-125a的錶達;抑製NFATc1的錶達則升高miR-125a的錶達.結論 miR-125a在作用于其靶基因——腫瘤壞死因子受體相關因子(TRAF)6的同時受到轉錄因子NFATc1的負反饋調控,髮揮其在破骨細胞分化中的調控作用.錶明通過調控NFATc1的錶達來改變miR-125a的錶達,可能成為骨代謝疾病新的治療靶點.
목적 연구파골세포분화중miR-125a수전록인자NFATc1적조공모식급기작용궤제,심조골대사질병신적치료파점.방법 단핵세포집락자격인자(M-CSF)화핵인자-κB배체적수체격활제(RANKL)유도CD14외주혈단핵세포(PBMCs)향파골세포분화.생물신식학운산예측결합우miR-125a계동자구역적전록인자,과표체실험화억제실험용우연구전록인자대miR-125a재파골세포분화중표체적영향,형광소매보고기인실험험증miR-125a여기파기인지간적결합,응효천이전영실험(EMSA)화염색질면역침정실험(CHIP)험증전록인자여miR-125a계동자구역적결합.결과 응효천이전영화염색질면역침정실험증명료NFATc1결합우miR-125a적계동자파위점.과표체NFATc1억제miR-125a적표체;억제NFATc1적표체칙승고miR-125a적표체.결론 miR-125a재작용우기파기인——종류배사인자수체상관인자(TRAF)6적동시수도전록인자NFATc1적부반궤조공,발휘기재파골세포분화중적조공작용.표명통과조공NFATc1적표체래개변miR-125a적표체,가능성위골대사질병신적치료파점.
