CAJ | 학술논문

目的探讨ARID1A (AT-rich interactive domain containing protein 1A)对乳腺癌发生、发展的影响,包括对细胞增殖、细胞周期、细胞凋亡的影响及潜在的机制.方法采用小发夹RNA(short hairpin RNA,shRNA)及小干扰RNA(small interfering RNA,siRNA)的RNA干扰技术(RNA interference,RNAi)下调细胞ARID1A基因表达,采用瞬时表达及稳定表达方法过表达ARID1A;通过Western blot检测干扰或过表达ARID1A基因后其蛋白表达水平及P-Akt、PARP和Caspase-3蛋白水平的变化,应用MTT法、细胞计数法及克隆形成检测细胞增殖的变化;应用流式细胞仪检测细胞凋亡及细胞周期的变化.结果应用RNA干扰技术沉默ARID1A基因后,乳腺癌细胞或正常乳腺细胞增殖速度显著上升(Bcap-37-siARID1A,P＜0.001;MCF7-siARID1A,P＜0.01;MCF10A-shARID1A,P＜0.001;HMEC-shARID1A,P＜0.001),Akt磷酸化水平上升,克隆形成能力显著提高.过表达ARID1A后,细胞增殖速率均显著下降(P＜0.001),Akt磷酸化水平下降,细胞周期发生变化,其中S期减少,G2期增多,同时细胞凋亡比例上升.结论 ARID1A在乳腺癌中发挥着抑制肿瘤生长的作用,提示ARID1A可能成为临床检测、诊断和治疗的有效潜在靶标.
목적 탐토ARID1A (AT-rich interactive domain containing protein 1A)대유선암발생、발전적영향,포괄대세포증식、세포주기、세포조망적영향급잠재적궤제.방법 채용소발협RNA(short hairpin RNA,shRNA)급소간우RNA(small interfering RNA,siRNA)적RNA간우기술(RNA interference,RNAi)하조세포ARID1A기인표체,채용순시표체급은정표체방법과표체ARID1A;통과Western blot검측간우혹과표체ARID1A기인후기단백표체수평급P-Akt、PARP화Caspase-3단백수평적변화,응용MTT법、세포계수법급극륭형성검측세포증식적변화;응용류식세포의검측세포조망급세포주기적변화.결과 응용RNA간우기술침묵ARID1A기인후,유선암세포혹정상유선세포증식속도현저상승(Bcap-37-siARID1A,P＜0.001;MCF7-siARID1A,P＜0.01;MCF10A-shARID1A,P＜0.001;HMEC-shARID1A,P＜0.001),Akt린산화수평상승,극륭형성능력현저제고.과표체ARID1A후,세포증식속솔균현저하강(P＜0.001),Akt린산화수평하강,세포주기발생변화,기중S기감소,G2기증다,동시세포조망비례상승.결론 ARID1A재유선암중발휘착억제종류생장적작용,제시ARID1A가능성위림상검측、진단화치료적유효잠재파표.