CAJ | 학술논문

目的：长链非编码RNA(long non-coding RNAs，lncRNAs)是一类转录本长度超过200nt的RNA分子，它们缺乏蛋白编码的潜能。近年来,大量证据表明lncRNAs能以RNA的形式在多种层面上(表观遗传调控、转录调控以及转录后调控等)调控基因的表达，从而在细胞增殖、细胞周期、分化和凋亡等多种生物学进程中发挥重要的作用。假基因转录得到的RNA也属于lncRNA的一类，以前被认为没有生物学功能，然而最近一些假基因被证实在肿瘤的发生中发挥着关键的作用。PTENP1被发现在几种肿瘤细胞中发挥着抑癌作用，然而它在胃癌中的表达和生物学功能仍不清楚。本文主要研究胃癌组织和细胞系中PTENP1的表达水平及其与临床病理资料的关系，并探索PTENP1在胃癌细胞中发挥的生物学功能及相关机制。方法：通过实时定量逆转录聚合酶链式反应(qRT-PCR)检测68例胃癌组织及4个胃癌细胞系中PTENP1的表达水平；通过去甲基化药物处理，研究PTENP1启动子异常甲基化与其表达的关系；分别转染pLJM-3'UTR或pLJM空质粒进入胃癌细胞系MGC-803及SGC-7901，通过CCK-8及平板克隆实验研究PTENP1对胃癌细胞增殖能力的影响，通过流式细胞分析及Hoechst staining实验研究PTENP1对细胞凋亡的影响，通过细胞划痕实验和transwell研究PTENP1对细胞迁移和侵袭能力的影响；通过qRT-PCR及Western blot分析质粒转染后PTEN的表达变化。结果：qRT-PCR检测结果显示PTENP1表达在胃癌组织和细胞系中显著下调，其表达下调可能部分与DNA超甲基化有关。而且，PTENP1的低表达与肿瘤的大小、胃癌病人临床分期、胃癌浸润深度及淋巴结转移有关。另外，结果显示PTENP1能够调节胃癌细胞的增殖、凋亡、迁移和侵袭。并且，PTENP13'UTR的表达升高能够提高PTEN蛋白的表达水平。结论：PTENP1在胃癌中表达显著下调，并能通过调节PTEN蛋白的表达发挥抑癌作用。目的：長鏈非編碼RNA(long non-coding RNAs，lncRNAs)是一類轉錄本長度超過200nt的RNA分子，它們缺乏蛋白編碼的潛能。近年來,大量證據錶明lncRNAs能以RNA的形式在多種層麵上(錶觀遺傳調控、轉錄調控以及轉錄後調控等)調控基因的錶達，從而在細胞增殖、細胞週期、分化和凋亡等多種生物學進程中髮揮重要的作用。假基因轉錄得到的RNA也屬于lncRNA的一類，以前被認為沒有生物學功能，然而最近一些假基因被證實在腫瘤的髮生中髮揮著關鍵的作用。PTENP1被髮現在幾種腫瘤細胞中髮揮著抑癌作用，然而它在胃癌中的錶達和生物學功能仍不清楚。本文主要研究胃癌組織和細胞繫中PTENP1的錶達水平及其與臨床病理資料的關繫，併探索PTENP1在胃癌細胞中髮揮的生物學功能及相關機製。方法：通過實時定量逆轉錄聚閤酶鏈式反應(qRT-PCR)檢測68例胃癌組織及4箇胃癌細胞繫中PTENP1的錶達水平；通過去甲基化藥物處理，研究PTENP1啟動子異常甲基化與其錶達的關繫；分彆轉染pLJM-3'UTR或pLJM空質粒進入胃癌細胞繫MGC-803及SGC-7901，通過CCK-8及平闆剋隆實驗研究PTENP1對胃癌細胞增殖能力的影響，通過流式細胞分析及Hoechst staining實驗研究PTENP1對細胞凋亡的影響，通過細胞劃痕實驗和transwell研究PTENP1對細胞遷移和侵襲能力的影響；通過qRT-PCR及Western blot分析質粒轉染後PTEN的錶達變化。結果：qRT-PCR檢測結果顯示PTENP1錶達在胃癌組織和細胞繫中顯著下調，其錶達下調可能部分與DNA超甲基化有關。而且，PTENP1的低錶達與腫瘤的大小、胃癌病人臨床分期、胃癌浸潤深度及淋巴結轉移有關。另外，結果顯示PTENP1能夠調節胃癌細胞的增殖、凋亡、遷移和侵襲。併且，PTENP13'UTR的錶達升高能夠提高PTEN蛋白的錶達水平。結論：PTENP1在胃癌中錶達顯著下調，併能通過調節PTEN蛋白的錶達髮揮抑癌作用。
목적：장련비편마RNA(long non-coding RNAs，lncRNAs)시일류전록본장도초과200nt적RNA분자，타문결핍단백편마적잠능。근년래,대량증거표명lncRNAs능이RNA적형식재다충층면상(표관유전조공、전록조공이급전록후조공등)조공기인적표체，종이재세포증식、세포주기、분화화조망등다충생물학진정중발휘중요적작용。가기인전록득도적RNA야속우lncRNA적일류，이전피인위몰유생물학공능，연이최근일사가기인피증실재종류적발생중발휘착관건적작용。PTENP1피발현재궤충종류세포중발휘착억암작용，연이타재위암중적표체화생물학공능잉불청초。본문주요연구위암조직화세포계중PTENP1적표체수평급기여림상병리자료적관계，병탐색PTENP1재위암세포중발휘적생물학공능급상관궤제。방법：통과실시정량역전록취합매련식반응(qRT-PCR)검측68례위암조직급4개위암세포계중PTENP1적표체수평；통과거갑기화약물처리，연구PTENP1계동자이상갑기화여기표체적관계；분별전염pLJM-3'UTR혹pLJM공질립진입위암세포계MGC-803급SGC-7901，통과CCK-8급평판극륭실험연구PTENP1대위암세포증식능력적영향，통과류식세포분석급Hoechst staining실험연구PTENP1대세포조망적영향，통과세포화흔실험화transwell연구PTENP1대세포천이화침습능력적영향；통과qRT-PCR급Western blot분석질립전염후PTEN적표체변화。결과：qRT-PCR검측결과현시PTENP1표체재위암조직화세포계중현저하조，기표체하조가능부분여DNA초갑기화유관。이차，PTENP1적저표체여종류적대소、위암병인림상분기、위암침윤심도급림파결전이유관。령외，결과현시PTENP1능구조절위암세포적증식、조망、천이화침습。병차，PTENP13'UTR적표체승고능구제고PTEN단백적표체수평。결론：PTENP1재위암중표체현저하조，병능통과조절PTEN단백적표체발휘억암작용。