CAJ | 학술논문

目的：流行病学研究表明，压力、慢性抑郁症和缺乏社会关心可作为癌症发生和进展的风险因素，但其机制并不清楚。自噬是细胞在多种应激状态下保护自身的一种重要机制，然而其在肿瘤发生发展中具有两种截然相反的作用：细胞保护作用及细胞毒作用。目前，关于应激在胃癌发生发展过程中的作用及自噬在应激下是促瘤作用还是抑瘤作用尚无相关研究。本研究探讨了慢性应激在胃癌发展过程中的作用及机制，并进一步探讨自噬在这一过程中的作用，为应激相关性胃癌的治疗提供新的思路。方法：采用束缚模具限制小鼠行动来建立应激模型；采用裸鼠皮下及原位移植瘤模型进行体内试验；在裸鼠后颈部皮下埋入微量药物泵来持续给予肾上腺素受体阻滞剂；采用高效液相色谱法检测小鼠血浆及胃组织中的儿茶酚胺浓度；采用电子显微镜及激光共聚焦显微镜观察自噬体的形成；采用118例胃癌及癌旁组织制作组织芯片。结果：去甲肾上腺素及β2受体激动剂明显促进胃癌细胞的增殖，而β1受体激动剂无此效应；下调β2受体的表达可以阻断去甲肾上腺素的作用；β2受体途径在胃癌细胞抗凋亡中也具有促进作用；电子显微镜及激光共聚焦显微镜发现β2受体途径可以增加自噬体的形成。蛋白印迹发现β2受体途径上调LC3-II/tubulin比值并降低自噬底物p62的水平。使用E64d及Pepstatin A抑制自噬后，明显减弱去甲肾上腺素在胃癌细胞中的上述作用；体内试验也证实了上述作用；机制研究发现AMPK-ULK1通路介导了自噬在胃癌细胞中的作用；组织芯片检测发现ADRB2的表达与p-AMPK呈正相关；生存分析发现ADRB2高表达是胃癌患者的不良预后因素。结论：慢性应激及其介质去甲肾上腺素通过增强自噬效应，促进胃癌细胞的增殖及抗凋亡能力。我们的结果为胃癌的治疗提供了新的潜在靶点。目的：流行病學研究錶明，壓力、慢性抑鬱癥和缺乏社會關心可作為癌癥髮生和進展的風險因素，但其機製併不清楚。自噬是細胞在多種應激狀態下保護自身的一種重要機製，然而其在腫瘤髮生髮展中具有兩種截然相反的作用：細胞保護作用及細胞毒作用。目前，關于應激在胃癌髮生髮展過程中的作用及自噬在應激下是促瘤作用還是抑瘤作用尚無相關研究。本研究探討瞭慢性應激在胃癌髮展過程中的作用及機製，併進一步探討自噬在這一過程中的作用，為應激相關性胃癌的治療提供新的思路。方法：採用束縳模具限製小鼠行動來建立應激模型；採用裸鼠皮下及原位移植瘤模型進行體內試驗；在裸鼠後頸部皮下埋入微量藥物泵來持續給予腎上腺素受體阻滯劑；採用高效液相色譜法檢測小鼠血漿及胃組織中的兒茶酚胺濃度；採用電子顯微鏡及激光共聚焦顯微鏡觀察自噬體的形成；採用118例胃癌及癌徬組織製作組織芯片。結果：去甲腎上腺素及β2受體激動劑明顯促進胃癌細胞的增殖，而β1受體激動劑無此效應；下調β2受體的錶達可以阻斷去甲腎上腺素的作用；β2受體途徑在胃癌細胞抗凋亡中也具有促進作用；電子顯微鏡及激光共聚焦顯微鏡髮現β2受體途徑可以增加自噬體的形成。蛋白印跡髮現β2受體途徑上調LC3-II/tubulin比值併降低自噬底物p62的水平。使用E64d及Pepstatin A抑製自噬後，明顯減弱去甲腎上腺素在胃癌細胞中的上述作用；體內試驗也證實瞭上述作用；機製研究髮現AMPK-ULK1通路介導瞭自噬在胃癌細胞中的作用；組織芯片檢測髮現ADRB2的錶達與p-AMPK呈正相關；生存分析髮現ADRB2高錶達是胃癌患者的不良預後因素。結論：慢性應激及其介質去甲腎上腺素通過增彊自噬效應，促進胃癌細胞的增殖及抗凋亡能力。我們的結果為胃癌的治療提供瞭新的潛在靶點。
목적：류행병학연구표명，압력、만성억욱증화결핍사회관심가작위암증발생화진전적풍험인소，단기궤제병불청초。자서시세포재다충응격상태하보호자신적일충중요궤제，연이기재종류발생발전중구유량충절연상반적작용：세포보호작용급세포독작용。목전，관우응격재위암발생발전과정중적작용급자서재응격하시촉류작용환시억류작용상무상관연구。본연구탐토료만성응격재위암발전과정중적작용급궤제，병진일보탐토자서재저일과정중적작용，위응격상관성위암적치료제공신적사로。방법：채용속박모구한제소서행동래건립응격모형；채용라서피하급원위이식류모형진행체내시험；재라서후경부피하매입미량약물빙래지속급여신상선소수체조체제；채용고효액상색보법검측소서혈장급위조직중적인다분알농도；채용전자현미경급격광공취초현미경관찰자서체적형성；채용118례위암급암방조직제작조직심편。결과：거갑신상선소급β2수체격동제명현촉진위암세포적증식，이β1수체격동제무차효응；하조β2수체적표체가이조단거갑신상선소적작용；β2수체도경재위암세포항조망중야구유촉진작용；전자현미경급격광공취초현미경발현β2수체도경가이증가자서체적형성。단백인적발현β2수체도경상조LC3-II/tubulin비치병강저자서저물p62적수평。사용E64d급Pepstatin A억제자서후，명현감약거갑신상선소재위암세포중적상술작용；체내시험야증실료상술작용；궤제연구발현AMPK-ULK1통로개도료자서재위암세포중적작용；조직심편검측발현ADRB2적표체여p-AMPK정정상관；생존분석발현ADRB2고표체시위암환자적불량예후인소。결론：만성응격급기개질거갑신상선소통과증강자서효응，촉진위암세포적증식급항조망능력。아문적결과위위암적치료제공료신적잠재파점。