贵阳医学院学报
貴暘醫學院學報
귀양의학원학보
JOURNAL OF GUIYANG MEDICAL COLLEGE
2015年
9期
947-953
,共7页
胡晓彦%王季石%吴乘龙%刘霞%钟愉
鬍曉彥%王季石%吳乘龍%劉霞%鐘愉
호효언%왕계석%오승룡%류하%종유
骨髓间充质干细胞%腺病毒科%载体%细胞色素P450 CYP2E1%黑色素瘤
骨髓間充質榦細胞%腺病毒科%載體%細胞色素P450 CYP2E1%黑色素瘤
골수간충질간세포%선병독과%재체%세포색소P450 CYP2E1%흑색소류
bone mesenchymal stem cells%adenoviridae%vector%cytochrome P450 CYP2E1%melanoma
目的:利用药前酶基因修饰的骨髓间充质干细胞(BMSCs)提高恶性黑色素瘤局部化疗效果.方法:从雄性大鼠股骨、胫骨骨髓中分离、培养大鼠BMSCs并鉴定;将细胞色素氧化酶P4502E1(CYP2E1)以含增强绿色荧光蛋白(enhanced green fluorescent protein,EGFP)的重组腺病毒为载体转染BMSCs,用RT-PCR和荧光显微镜观察绿色荧光的方法来检测目的基因的表达;将人黑色素瘤细胞MV3注射到裸鼠背部皮下,建立裸鼠MV3移植瘤模型,将移植瘤模型分为4组,分别给予CYP2E1-BMSCs及达卡巴嗪,单用CYP2E1-BMSCs,单用达卡巴嗪以及生理盐水治疗,并检测各组的体内局部抗肿瘤效应.结果:成功分离培养大鼠BMSCs,形态上均一,贴壁生长,以长梭形为主,体积小,核浆比大,呈明显的同向性改变,漩涡状盘旋排列;流式细胞术检测提示高表达CD29、CD71,低表达CD34、CD45;体外经不同诱导体系培养后提示具有成骨、成脂、成软骨潜能;鉴定后的BMSCs经重组腺病毒转染后,荧光显微镜可观察到转基因靶细胞EGFP表达,RT-PCR法从mRNA水平检测到目的基因在转基因细胞中表达;荧光显微镜观察治疗后裸鼠的肿瘤及各脏器的组织切片提示CYP2E1-BMSCs能聚集在肿瘤组织及转移灶周围,CYP2E1-BMSCs联合化疗药物组局部凋亡率明显高于单纯化疗组及空白对照.结论:CYP2E1-BMSCs在体内具有协同化疗药物抗肿瘤的作用,并有向肿瘤细胞聚集的特点.
目的:利用藥前酶基因脩飾的骨髓間充質榦細胞(BMSCs)提高噁性黑色素瘤跼部化療效果.方法:從雄性大鼠股骨、脛骨骨髓中分離、培養大鼠BMSCs併鑒定;將細胞色素氧化酶P4502E1(CYP2E1)以含增彊綠色熒光蛋白(enhanced green fluorescent protein,EGFP)的重組腺病毒為載體轉染BMSCs,用RT-PCR和熒光顯微鏡觀察綠色熒光的方法來檢測目的基因的錶達;將人黑色素瘤細胞MV3註射到裸鼠揹部皮下,建立裸鼠MV3移植瘤模型,將移植瘤模型分為4組,分彆給予CYP2E1-BMSCs及達卡巴嗪,單用CYP2E1-BMSCs,單用達卡巴嗪以及生理鹽水治療,併檢測各組的體內跼部抗腫瘤效應.結果:成功分離培養大鼠BMSCs,形態上均一,貼壁生長,以長梭形為主,體積小,覈漿比大,呈明顯的同嚮性改變,漩渦狀盤鏇排列;流式細胞術檢測提示高錶達CD29、CD71,低錶達CD34、CD45;體外經不同誘導體繫培養後提示具有成骨、成脂、成軟骨潛能;鑒定後的BMSCs經重組腺病毒轉染後,熒光顯微鏡可觀察到轉基因靶細胞EGFP錶達,RT-PCR法從mRNA水平檢測到目的基因在轉基因細胞中錶達;熒光顯微鏡觀察治療後裸鼠的腫瘤及各髒器的組織切片提示CYP2E1-BMSCs能聚集在腫瘤組織及轉移竈週圍,CYP2E1-BMSCs聯閤化療藥物組跼部凋亡率明顯高于單純化療組及空白對照.結論:CYP2E1-BMSCs在體內具有協同化療藥物抗腫瘤的作用,併有嚮腫瘤細胞聚集的特點.
목적:이용약전매기인수식적골수간충질간세포(BMSCs)제고악성흑색소류국부화료효과.방법:종웅성대서고골、경골골수중분리、배양대서BMSCs병감정;장세포색소양화매P4502E1(CYP2E1)이함증강록색형광단백(enhanced green fluorescent protein,EGFP)적중조선병독위재체전염BMSCs,용RT-PCR화형광현미경관찰록색형광적방법래검측목적기인적표체;장인흑색소류세포MV3주사도라서배부피하,건립라서MV3이식류모형,장이식류모형분위4조,분별급여CYP2E1-BMSCs급체잡파진,단용CYP2E1-BMSCs,단용체잡파진이급생리염수치료,병검측각조적체내국부항종류효응.결과:성공분리배양대서BMSCs,형태상균일,첩벽생장,이장사형위주,체적소,핵장비대,정명현적동향성개변,선와상반선배렬;류식세포술검측제시고표체CD29、CD71,저표체CD34、CD45;체외경불동유도체계배양후제시구유성골、성지、성연골잠능;감정후적BMSCs경중조선병독전염후,형광현미경가관찰도전기인파세포EGFP표체,RT-PCR법종mRNA수평검측도목적기인재전기인세포중표체;형광현미경관찰치료후라서적종류급각장기적조직절편제시CYP2E1-BMSCs능취집재종류조직급전이조주위,CYP2E1-BMSCs연합화료약물조국부조망솔명현고우단순화료조급공백대조.결론:CYP2E1-BMSCs재체내구유협동화료약물항종류적작용,병유향종류세포취집적특점.
